CTHRC1通过JNK1/2信号通路介导IL-1β诱导的成软骨细胞凋亡

发布时间：2024-03-03 23:20

　　目的本研究一方面从临床收集骨关节炎(OA)患者关节液分析其中CTHRC1和IL-1β的含量,另一方面制备原代大鼠软骨细胞,用IL-1β处理诱发骨关节炎细胞模型,分析CTHRC1在骨关节炎患者软骨细胞凋亡中的分子机制。方法收集安徽医科大学第一附属医院(合肥)2012年6月至2016年4月间行膝关节置换术的OA患者(67.9±7.2岁,男:女,11:39)关节液标本(n=50)。同时采集安徽医科大学第一附属医院30例(62.8±11.2岁,男:女,1:4)无OA或其他关节疾病史的外伤患者关节液标本。采用ELISA试剂盒检测OA和创伤患者关节液中CTHRC1和IL-1β的表达水平。制备原代大鼠膝关节软骨细胞,用IL-1β处理诱发骨关节炎细胞模型,通过Western blot观察CTHRC1和JNK1/2的表达量变化,CCK-8试剂盒分析IL-1β作用后软骨细胞的增殖能力的变化,流式细胞术分析IL-1β作用后软骨细胞的凋亡比例变化,分析CTHRC1、IL-1β和JNK1/2信号通路在骨关节炎中的关系。随后使用表达CTHRC1和CTHRC1-sh RNA的慢病毒感染骨关节炎细胞模型,分析CTHR...

【文章页数】：70 页

【学位级别】：博士

【部分图文】：

图1IL-1β参与骨关节炎的信号途径

安徽医科大学博士研究生毕业论文17PI3K/Akt和JNK信号途径，增加氧分压通过调节谷胱甘肽抗氧化系统使软骨细胞更容易受到氧化应激介导的细胞凋亡。次黄嘌呤-黄嘌呤氧化酶（XOD）诱导生成的H2O2抑制关节软骨细胞的生长，脂质过氧化产物4-羟基炔诺酮(HNE)通过激活caspas....

图2shRNA质粒构建的示意图

安徽医科大学博士研究生毕业论文27EDTA（pH=8.0）、57.1mL冰乙酸，定容至1L，室温保存备用Kan溶液用去离子水溶解卡那霉素粉末配制成50mg/mL的贮存液，过滤除菌后分装与1.5mlEP管中，-20℃保存备用Amp溶液用去离子水溶解氨苄青霉素粉末配制成50mg/mL....

图5pLVX-Puro载体图谱

安徽医科大学博士研究生毕业论文322)将冻存的病毒液在冰上溶解，在EP管中按10倍稀释连续10个稀释度（10~10-8）。3)吸弃96孔板中的培养基，每孔加入100μl稀释好的病毒液，继续培养48h。4)在倒置荧光显微镜下观察结果，并计数发荧光的细胞数目，以此计算病毒滴度。2.4....

本文编号：3918510