miR-363对骨肉瘤细胞的调控作用及其分子机制研究

发布时间：2024-03-24 04:55

　　目的:骨肉瘤(osteosarcoma,OS),起源于间叶组织,是儿童和青少年中最多见的原发性恶性骨肿瘤,约占所有原发恶性骨肿瘤的15%-23%。虽然手术结合新辅助化疗的治疗方式显著改善了骨肉瘤患者的预后,但是,在过去30年里,病人的存活率并没有显著的提升,特别对于产生耐药性的患者或在诊断时就己发生转移的患者,临床治疗效果仍然欠佳,存活率仍然小于30%。因此,探讨骨肉瘤发生、发展的分子机制,并为骨肉瘤的治疗、诊断和预后寻找新的生物标志物是一项重要和迫切的任务。微小RNA(miRNA)是重要的转录后调控因子,这些非编码小RNAs与特异性同源序列靶转录物的3’-非翻译区(3’-UTR)相结合,通常会导致靶基因的翻译抑制和基因的沉默。PDZD2是促进胰岛瘤细胞增殖的多PDZ结构域蛋白,己明确其在前列腺肿瘤发生过程中上调,但是PDZD2在骨肉瘤中的功能仍不清楚。miRNA的失调可以通过其对靶基因的调节促进肿瘤的发生,增殖和转移。本研究调查了 miR-363和PDZD2在骨肉瘤细胞MG-63中的功能,以及miR-363和PDZD2的相互作用关系,以探究miR-363对骨肉瘤细胞的调控作用及其分子...

【文章页数】：80 页

【学位级别】：博士

【部分图文】：

图２?ｍｉＲ－３６３与ＰＤＺＤ２的表达呈负调控关系??

通过对８对骨肉瘤组织和瘤旁组织的ｑＰＣＲ检测并对比后发现骨肉瘤组织??中的ｍｉＲ－３６３呈现低表达，而ＰＤＺＤ２的表达则升高（图１?），且二者表达呈现负??调控的趋势（图２）。结果有统计学差异。??１４??

图３不同细胞株中ｍｉＲ－３６３的表达水平??Ｆｉｇ．?３?Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ?ｌｅｖｅｌ?ｏｆ?ｍｉＲ－３６３?ｉｎ?ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ?ｃｅｌｌ?ｌｉｎｅｓ??

通过对成骨细胞株ｈＦＯＢｌ．１９和骨肉瘤细胞株ＭＧ－６３、ＨＯＳ和Ｓａｏｓ－２的??ｑＰＣＲ检测，发现ｍｉＲ－３６３在骨肉瘤细胞株中呈现低表达状态，其中ＭＧ－６３细??胞的ｍｉＲ－３６３低表达与其他骨肉瘤细胞相比较显著（

图4设计合成的miR-363NC.mimics序列

ａ丄??＊??■?Ｔ??＊＊??丁??ｈＦＯＢ１．１９?ＭＧ－６３?ＨＯＳ?Ｓａｏｓ－２??图３不同细胞株中ｍｉＲ－３６３的表达水平??Ｆｉｇ．?３?Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ?ｌｅｖｅｌ?ｏｆ?ｍｉＲ－３６３?ｉｎ?ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ?ｃｅｌｌ?ｌｉｎｅｓ??３．３通过转染使骨肉瘤细....

图５转染后细胞中ｍｉＲ－３６３的表达??Ｆｉｇ．５?Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ?ｏｆ?ｍｉＲ－３６３?ｉｎ?ｃｅｌｌｓ?ａｆｔｅｒ?ｔｒａｎｓｆｅｃｔｉｏｎ??

３．３通过转染使骨肉瘤细胞中ｍｉＲ－３６３过表达??首先设计合成ｍｉＲ－３６３ＮＣ、ｍｉｍｉｃｓ序列（图４），转染骨肉瘤细胞ＭＧ－６３；??然后用ｑＰＣＲ检测转染的效果，如图５所示，相比ＭＧ－６３＋ＮＣ组，ＭＧ－６３＋ｍｉｍｉｃｓ??组中的ｍｉＲ－３６３含量显著增高，表明转染可提....

本文编号：3937000