MicroRNA调控CKIP-1促进骨形成的机制研究

发布时间：2024-03-30 09:20

　　目的:有国内外相关研究指出:老年群体是骨科疾病的最易发群体,其中骨质疏松和骨质疏松引发的骨折疾病是最常见的疾病。有数据指出全球50岁以上的群体中有近15%左右的老年人患有骨质疏松或骨折疾病,而每三十秒,就会有一例骨折患者出现(仅纳入骨质疏松病例);而如果将疾病调查对象转到航天员或战士等特殊职业人群,骨质疏松和骨折的发病率则更高。面对如此高的发病率,俨然相关疾病不容被忽视。针对目前骨折愈合治疗缓慢及骨质疏松多发且治疗困难等原因;设计相关实验:筛选可调控骨形成负调控基因(CKIP-1)的小分子调控物(microRNA),在细胞和动物层次证实靶向关系及对骨形成的影响。细胞层次证实对间充质干细胞(BMSCs)分化有调控作用;在动物层次证实对动物骨形成(骨折、骨质疏松)有促进作用。相关实验的开展期望为现代骨科疾病的治疗与康复提供新的理论依据。方法:细胞水平实验利用生物信息学手段筛选可调控CKIP-1基因的相关miRNA并证实相关miRNA的调控作用。初步筛选了可以调控CKIP-1的几种miRNA;之后提取了鼠股骨的骨髓间充质干细胞(BMSCs),使用细胞侵染方法验证let-7i-5p对BMSCs...

【文章页数】：83 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

图1.1荧光检测细胞纯度（抗体CD90）

图1.1荧光检测细胞纯度（抗体CD90）1.3.3骨髓间充质干细胞成骨诱导设置三个成骨分化诱导时间点：7、14和21天。我们先对不同诱导时间点的骨髓间充质干细胞进行碱性磷酸酶染色；显微镜下观测间充质干细胞核为红色至粉红色，阳性显色表现为蓝紫色至蓝黑色。比较各个诱导时....

图1.2BMSCs细胞ALP染色

图1.1荧光检测细胞纯度（抗体CD90）1.3.3骨髓间充质干细胞成骨诱导设置三个成骨分化诱导时间点：7、14和21天。我们先对不同诱导时间点的骨髓间充质干细胞进行碱性磷酸酶染色；显微镜下观测间充质干细胞核为红色至粉红色，阳性显色表现为蓝紫色至蓝黑色。比较各个诱导时....

图1.3候选miRNA在成骨诱导前后的表达变化

军事科学院硕士学位论文髓间充质干细胞14天后，5种miRNA均有明显的变化。其中：let-7d-5p、i-5p、miR-98-5p和miR-129-5p在成骨诱导之后表达发生了明显的上升；-490-3p在成骨诱导之后表达发生了明显下降。其中miR-98-5p....

图2.1siRNA转染效率

军事科学院硕士学位论文2.3结果2.3.1干扰CKIP-1表达可显著促进BMSCs成骨分化为证实CKIP-1对BMSCs成骨过程有负调控作用，将人工合成的CKIP-1-siRNA转染到细胞中。使用荧光显微镜来检测细胞转染效率，结果表明转染效率大于90%（图....

本文编号：3942147