LncRNA H19介导miR-188调控LCoR表达对小鼠骨髓间充质干细胞分化作用的实验研究

发布时间：2024-04-18 18:53

　　研究背景:临床工作中,因暴力所致的骨折是创伤骨科、手足外科等四肢创伤修复科室最常见的疾病,特点是成因比较复杂、损伤位置多样、累及人群广泛等,往往给患者及家庭带来较重的身心障碍与经济负担。尽管骨具有较强的愈合能力,但依然有约10%的骨折愈合将受到不同程度干扰,如感染、神经营养因素等问题造成的骨缺损、骨髓炎、骨坏死、骨折不愈合或畸形愈合等并发症同样是治疗中的难点^[1]。所以,探讨新生骨组织形成的生理过程与成骨调节机制,能够为临床治疗提供新的思路与靶点。骨折,是指骨结构的连续性被完全或部分破坏。机体为恢复骨骼原有的功能及结构,将触发一个多因素调控的复杂再生修复过程。Giannoudis等^[2]曾提出影响骨折愈合过程的四个主要因素:相关生长因子、骨组织支架、间充质干细胞和力学环境,而这几方面也是治疗骨折的重要切入点。其中,间充质干细胞分化在促进骨组织形成和骨折愈合修复的全过程里扮演着重要角色。骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)又称骨髓源性的间充质干细胞(bone marrow-deri...

【文章页数】：114 页

【学位级别】：博士

【文章目录】：
摘要
abstract
第1章 绪论
    1.1 概述
    1.2 Lnc RNA与骨髓间充质干细胞
        1.2.1 Lnc RNA的分类、结构与功能
        1.2.2 Lnc RNA对骨髓间充质干细胞的调控
    1.3 mi RNA与骨髓间充质干细胞
        1.3.1 mi RNA的结构与功能
        1.3.2 mi RNA调控骨髓间充质干细胞
    1.4 总结和展望
第2章 小鼠骨髓间充质干细胞分离、培养与鉴定
    2.1 引言
    2.2 实验材料与方法
        2.2.1 实验动物
        2.2.2 主要仪器与耗材
        2.2.3 主要试剂与溶液
        2.2.4 实验方法
    2.3 实验结果
        2.3.1 m BMSCs形态学观察
        2.3.2 MTT法检测m BMSCs增殖能力
        2.3.3 流式细胞术鉴定m BMSCs表面标志物
        2.3.4 茜素红染色鉴定m BMSCs成骨分化
        2.3.5 油红O染色鉴定m BMSCs成脂分化
    2.4 讨论
    2.5 小结
第3章 Lnc RNA H19、mi R-188 与LCo R在m BMSCs中的相互作用
    3.1 引言
    3.2 实验材料与方法
        3.2.1 主要仪器与耗材
        3.2.2 主要试剂与溶液
        3.2.3 实验方法
    3.3 实验结果
        3.3.1 微阵列芯片显示mi RNA、Lnc RNA和m RNA的差异表达
        3.3.2 q RT-PCR检测mi R-188、Lnc RNA H19、LCo R在m BMSCs中的表达水平
        3.3.3 Western blot检测LCo R的蛋白表达水平
        3.3.4 验证Lnc RNA H19与mi R-188 之间的关系
        3.3.5 验证mi R-188 与LCo R之间的关系
    3.4 讨论
    3.5 小结
第4章 LCo R在调控m BMSCs成骨及成脂分化过程中的作用机制和体内研究
    4.1 引言
    4.2 实验材料与方法
        4.2.1 主要仪器与耗材
        4.2.2 主要试剂与溶液
        4.2.3 实验动物
        4.2.4 实验方法
    4.3 实验结果
        4.3.1 GO分析和KEGG分析明确信号通路相互作用网络
        4.3.2 体外验证LCo R影响m BMSCs成骨成脂分化的信号通路
        4.3.3 LCo R对骨折愈合影响的动物实验研究
    4.4 讨论
    4.5 小结
第5章 全文总结
参考文献
作者简介及在读期间发表论文情况
致谢



本文编号：3957598