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PDGF-bb联合BMP-2生长因子对骨膜来源干细胞在二维培养和可注射水凝胶Gelatin-Hpa中增殖及成骨分化能力的

发布时间:2024-04-21 18:40
  前言: 前交叉韧带(ACL)损伤后往往出现关节稳定性差,引起膝关节反复损伤,这样会加快关节软骨逐步退化。膝关节交叉韧带重建术后的腱骨愈合是一个非常复杂和漫长的过程,长期以来一直是运动医学领域治疗的热点、难点问题。目前所有针对交叉韧带重建术后促进腱骨愈合的方法很多,但远期疗效均不是十分理想,在这种情况下,作为一种可选择性的替代疗法,以干细胞为核心的组织工程方法为促进腱骨愈合提供了新的方法。通常组织工程方法促进隧道内的腱骨愈合需要具备以下三个条件:首先组织来源的干细胞数量必须充足,生物功能正常,具有向成骨分化能力的种子干细胞;其次需要具备良好生物相容性,可以细胞无毒性降解、孔隙直径和孔隙率适合的三维生物支架;最后需要包含有调节种子干细胞增殖、分化并能维持干细胞表型特征的细胞生长因子。 骨膜来源干细胞(Periosteum-Dirved Stem Cells, PDSCs)是来自骨膜内层的成体干细胞,由于其比其他成体干细胞来源充足,取材方便,而且在体外培养的条件下骨膜来源干细胞具有很强的传代增殖和稳定的定向分化能力。PDSCs与骨髓间充质干细胞(bone-marrow mesenchymal...

【文章页数】:133 页

【学位级别】:博士

【部分图文】:

图6:不同代的PDSCs在成骨培养基作用下械性確酸酵!^活性在第7,14天的时候表现不同代的PDSCs在成骨培养基作用下,7天及14天后,均表现出较强的碱性

图6:不同代的PDSCs在成骨培养基作用下械性確酸酵!^活性在第7,14天的时候表现不同代的PDSCs在成骨培养基作用下,7天及14天后,均表现出较强的碱性

其减性碟酸醇活性也相应的降低,其中P3与P7之同有显著性区别(包括第7天和第14天)(见图6)。3.5骨膜来源干细胞生长曲线25


图7:不同代PDSCs在培养9天后的生长曲线

图7:不同代PDSCs在培养9天后的生长曲线

图7:不同代PDSCs在培养9天后的生长曲线细胞生长曲线呈S形(图7),第3代骨膜细胞接种后经至潜伏期为3d左右,之后细胞进入增殖较快的对数生长期,7天后细胞基本融合铺满瓶底,这时细胞进入下个阶段平台期,细胞明显增殖缓慢。实验发现第3代与第7代骨膜细胞增殖能力相似,虽然增殖能力略....


图3:免疫磁珠细胞分离操作示意图

图3:免疫磁珠细胞分离操作示意图

浙江大学博士学位论文 第一部分离器进行分离,并成功分离出PDSCs众所周知克隆形成能力是干细胞的重要特征。PDSCs在极低密度培养条件下表现出很强的自我复制能力并形成克隆。这表明PDSCs具有很强的增殖能力,具有从一个单细胞形成克隆的潜能。到目前为止,尚未有研究显示找到特异性表面....


图4:骨膜来源干细胞分别在单独PDGF-bb或者联合BMP-2生长因子作用下的碱性碟酸酶活力与对照组(0M)比较,单独添加BMP-2或者联合添加BMP-2和PDGF-bb组的碱

图4:骨膜来源干细胞分别在单独PDGF-bb或者联合BMP-2生长因子作用下的碱性碟酸酶活力与对照组(0M)比较,单独添加BMP-2或者联合添加BMP-2和PDGF-bb组的碱

g I Im150ng/mlPDGF-bb、 <5 、 免Day图3:第三代骨?来源干细胞在含有不同浓度PDGF-bb生长因子(1Ong/mL20ng/ml,50ng/ml,100ng/ml.]50ng/ml)培养基作用下分别培养3,5,7,9天后增殖情况表现结....



本文编号:3961300

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