核酸适体S11e对纤维肉瘤的分子识别和抑癌作用

发布时间：2024-04-27 04:20

　　纤维肉瘤是一种起源于间充质的罕见的恶性肿瘤。它具有高侵袭性,可以通过血液循环或淋巴系统转移到肺、骨骼系统、肝脏等身体其它部位。相比于其他的软组织肉瘤,纤维肉瘤具有更高的复发率,预后较差。目前纤维肉瘤主要是通过手术切除进行治疗,但这种方法不适用于位于深部组织的肿瘤。此外,特异性生物标志物的缺乏使得难以准确诊断纤维肉瘤。因此,寻找能特异性识别纤维肉瘤的分子探针对疾病的早期诊断、靶向治疗和精准预后都有着重大意义。核酸适体作为一种探针分子,由于其具有高亲和力、高特异性、低免疫原性等特性而被广泛用于生物医学、生物化学等领域。在本工作中,我们用非SELEX方法发现DNA核酸适体S11e可以识别纤维肉瘤HT1080细胞,但对人胚肺成纤维细胞MRC-5无识别能力。S11e对HT1080细胞具有良好的结合亲和力,结合的平衡解离常数值在纳摩尔的范围内。体内和体外荧光成像进一步证实S11e可以识别HT1080异种移植裸鼠模型和纤维肉瘤病人临床组织中的肿瘤样本。在激光共聚焦下,我们发现核酸适体S11e在生理条件下可以内化到HT1080细胞中,并结合到线粒体上。CCK-8毒性试验和膜联蛋白Annexin V-F...

【文章页数】：64 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
Abstract
第1章 绪论
    1.1 纤维肉瘤
        1.1.1 纤维肉瘤的定义及分类
        1.1.2 纤维肉瘤的病因
        1.1.3 纤维肉瘤的临床及病理表现
        1.1.4 纤维肉瘤的分级及预后
        1.1.5 纤维肉瘤的诊断及治疗
    1.2 核酸适体
        1.2.1 核酸适体的定义及特点
        1.2.2 核酸适体的应用
    1.3 线粒体
        1.3.1 线粒体与细胞死亡
        1.3.2 线粒体与肿瘤
        1.3.3 线粒体与肿瘤能量代谢
    1.4 本论文开展的工作
第2章 纤维肉瘤核酸适体的检测及性质考察
    2.1 前言
    2.2 实验部分
        2.2.1 实验中用到的试剂、核酸序列、细胞系及仪器
        2.2.2 实验方法
    2.3 结果与讨论
        2.3.1 鉴定与HT1080 细胞结合的核酸适体
        2.3.2 核酸适体二级结构预测
        2.3.3 核酸适体的截短优化
        2.3.4 核酸适体的亲和性
        2.3.5 核酸适体的稳定性
        2.3.6 核酸适体靶标类型检测
        2.3.7 核酸适体内化分析
        2.3.8 组织芯片结果分析
        2.3.9 活体成像结果分析
    2.4 小结
第3章 S11e对HT1080细胞的促凋亡及抑制迁移能力的检测
    3.1 前言
    3.2 实验部分
        3.2.1 实验中用到的试剂、及仪器
        3.2.2 实验方法
    3.3 结果与讨论
        3.3.1 共定位实验结果
        3.3.2 毒性实验结果
        3.3.3 流式凋亡实验结果
        3.3.4 划痕实验结果
    3.4 小结
结论与展望
参考文献
附录 A 攻读学位期间所发表的学术论文目录
致谢



本文编号：3965346