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玻璃化冻存方案对同种异体瓣膜免疫原性的影响及MitoQ对VS83方案组织活性提升作用研究

发布时间:2024-05-19 09:33
  研究背景:同种瓣具有良好的血流动力学和较高的抗感染特性,但在部分接受同种瓣移植的患者中出现衰败加速的问题,其原因主要与瓣膜本身的免疫原性和冻存过程中造成的组织损伤有关。近年来,几种组织玻璃化保存方法被提出,研究显示玻璃化方案具有降低组织免疫原性的作用。但一方面,其免疫调节机制不明确,且玻璃化组织活性与免疫原性间的关系存在争议,另一方面VS83方案中存在严重组织活性损害,需要进一步改进。目的:(1)探究VS55方案对带瓣主动脉组织免疫原性的影响及其与NLRP3炎性小体激活的联系,阐明玻璃化组织活性与其免疫原性间的联系。(2)在VS83方案中加入抗氧化剂Mito Q,探索该方案对组织活性的提升作用及其对组织细胞线粒体动力学的影响。方法和结果:第一部分研究使用新西兰兔带瓣主动脉作为实验材料,为消除不同保存方法内皮残留不同对实验结果造成的影响,我们首先对组织进行了脱内皮处理。将脱内皮后的组织,随机分为新鲜对照组、梯度降温组(CFC组)和VS55方案组(IFC组),并使用不同方案保存。8周后取出保存的组织,进行组织复温,对复温后组织的活性和组织内ATP水平以及NLRP3炎性小体激活情况进行检测,...

【文章页数】:56 页

【学位级别】:硕士

【部分图文】:

图1.1组织去内皮效果A:HE染色(100)B:扫描电镜

图1.1组织去内皮效果A:HE染色(100)B:扫描电镜

学分析使用GraphPadPrism6.0软件进行分析,所得结果以均数±标准差形较采用t-检验,P<0.05时认为差异具有统计学意义。结果培养结果细菌培养结果均为阴性,提示组织处理过程中不存在微生物污染的皮效果(图1.1)染色显示,主动脉组织内皮细胞去除完全,除内....


图1.2带瓣主动脉组织VG染色结果(40):新鲜组(A),CFC组(B),IFC组(C)

图1.2带瓣主动脉组织VG染色结果(40):新鲜组(A),CFC组(B),IFC组(C)

图1.2带瓣主动脉组织VG染色结果(40):新鲜组(A),CFC组(B),IFC组(C)4组织活性和ATP含量(图1.3)如图所示,在组织活性方面,与对照组相比,CFC组(80.2±1.61%)与IFC组(72%)内活性均有较高程度的保留;CFC....


图1.3不同组内组织活性(A)和ATP含量(B)检测结果

图1.3不同组内组织活性(A)和ATP含量(B)检测结果

性纤维断裂的表现。图1.2带瓣主动脉组织VG染色结果(40):新鲜组(A),CFC组(B),IFC组(C)2.4组织活性和ATP含量(图1.3)如图所示,在组织活性方面,与对照组相比,CFC组(80.2±1.61%)与IFC组(77.91±2%)内....


图1.4Westernblot法和real-timePCR法测定NLRP3炎性小体的激活情况

图1.4Westernblot法和real-timePCR法测定NLRP3炎性小体的激活情况

图1.4Westernblot法和real-timePCR法测定NLRP3炎性小体的激活情况养6h后由real-timePCR法测得NLRP3(A)、IL-1β(B)、caspase-1(C)在转录水<0.01与新鲜组比较;*P<0.....



本文编号:3977925

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