高糖在椎间盘退行性变中的影响及NF-κB信号通路的作用研究

发布时间：2024-10-29 19:10

　　目的与意义:腰痛是当代社会中的多发病与常见病,在人群中十分普遍。70%至85%的人曾患过腰痛,且首次发作后再次发作的概率很高。椎间盘退变(Intervertebral disc degeneration,IVDD)的基本病理特征是髓核细胞的衰老与凋亡、细胞外基质的降解、椎间盘进行性的纤维化。近来有学者研究发现,椎间盘退变与代谢性疾病,尤其是与糖尿病具有明显的相关性,但具体机制尚未有深入研究。本实验拟探究高糖微环境对椎间盘退行性变的影响以及NF-κB信号通路在其中的作用,进一步揭示高糖诱导椎间盘髓核细胞退变的机制,为延缓、阻止椎间盘退变提供研究基础,为治疗IVDD带来新的策略和方法。研究方法:1、高糖微环境诱导IVDD发病:使用5.5 mmol/L、15mmol/L、30 mmol/L、100 mmol/L不同浓度葡萄糖培养基培养髓核细胞,RT-PCR检测髓核细胞MMP-3、MMP-13、Aggrecan、CollagenⅡ的表达;2、高糖微环境通过NF-κB信号通路调控IVDD发病:使用Bay11-7082抑制NF-κB信号通路激活,再使用RT-PCR、Western Blot检测髓核细...

【文章页数】：54 页

【学位级别】：硕士

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摘要
ABSTRACT
英文缩略词表
前言
1 高糖诱导的退变椎间盘髓核细胞模型的建立
    1.1 引言
    1.2 材料与方法
        1.2.1 主要实验仪器
        1.2.2 主要实验试剂
        1.2.3 椎间盘标本收集
        1.2.4 原代髓核细胞提取与培养
        1.2.5 髓核细胞冻存
        1.2.6 髓核细胞复苏
        1.2.7 不同浓度葡萄糖培养髓核细胞
        1.2.8 RT-PCR
        1.2.9 统计学分析
    1.3 结果
        1.3.1 髓核细胞形态
        1.3.2 RT-PCR检测结果
    1.4 讨论
    1.5 结论
2 高糖通过转录因子NF-κB诱导椎间盘髓核细胞退变
    2.1 引言
    2.2 材料与方法
        2.2.1 主要实验仪器
        2.2.2 主要实验试剂
        2.2.3 Bay11-7082 抑制 NF-κB 信号通路
        2.2.4 RT-PCR
        2.2.5 Western Blot检测
        2.2.6 统计学分析
    2.3 结果
        2.3.1 RT-PCR检测NF-κB通路抑制后细胞外基质与金属蛋白酶的表达
        2.3.2 Western Blot检测MMP-3、MMP-13 蛋白表达
    2.4 讨论
    2.5 结论
3 结束语
    3.1 主要工作与创新点
    3.2 后续研究工作
参考文献
致谢
攻读硕士学位期间已发表或录用的论文



本文编号：4008491