CB2R通过调节巨噬细胞M1/M2极化促进骨骼肌缺血再灌注损伤后肌细胞再生的研究

发布时间：2024-12-21 01:19

　　目的:缺血再灌注(Ischemia-reperfusion,IR)引起的骨骼肌损伤在临床医学和法医学实践中都很常见。骨骼肌损伤后的再生主要指卫星细胞(Satellite cells,SCs)的激活、增殖、分化、肌母细胞的延伸与融合以及新生肌管的形成,最后形成完整的骨骼肌纤维。一些转录因子比如,MyoD、myogenin均参与调控卫星细胞的增殖与分化过程和骨骼肌纤维的形成。众多实验研究发现,Ⅱ型大麻素受体(Cannabinoid type 2 receptor,CB2R)具有保护组织损伤,促进组织再生的作用。本课题组前期研究指出,在大鼠的骨骼肌挫伤后的骨骼肌细胞、肌成纤维细胞及巨噬细胞中都时序性的表达一定水平的CB2R。同时,在给予CB2R的激动剂后,肌细胞的再生明显得到改善。由此可见,CB2R对骨骼肌的再生起到促进作用。巨噬细胞是一种免疫细胞,依赖于自身高度的可塑性和异质性,可以分为两种表型状态,即经典途径活化的M1和选择性途径活化的M2。目前有文章指出,巨噬细胞对组织再生的调控主要是通过改变自身的极化来发挥不同的作用。本课题组的前期实验结果指出在皮肤损伤模型中CB2R可以改变巨噬细胞的...

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摘要
Abstract
英文缩略词
1 前言
2 材料和方法
    2.1 主要试剂和仪器
        2.1.1 主要试剂
        2.1.2 主要仪器
    2.2 研究对象和分组
    2.3 实验方法
        2.3.1 小鼠后肢骨骼肌缺血再灌注损伤模型制作
        2.3.2 组织取材与处理
        2.3.3 CB2R-KO小鼠基因型测定
        2.3.4 H&E染色
        2.3.5 免疫组织化学染色
        2.3.6 免疫荧光染色
        2.3.7 腹腔巨噬细胞分离
        2.3.8 巨噬细胞诱导分型
        2.3.9 细胞共培养实验
        2.3.10 细胞免疫荧光
        2.3.11 流式细胞术
        2.3.12 Western blot检测
        2.3.13 数据处理与统计
3 结果
    3.1 CB2R基因敲除验证结果
    3.2 CB2R敲除导致骨骼肌缺血再灌注损伤后肌细胞再生受损
    3.3 CB2R敲除增加骨骼肌损伤区M1型细胞浸润,减少M2型细胞浸润
    3.4 CB2R敲除增强M1基因的蛋白表达,减弱M2基因的蛋白表达
    3.5 CB2R敲除促进巨噬细胞在体外向M1极化而抑制向M2极化
    3.6 C2C12成肌细胞诱导分化后形态学改变
    3.7 CB2R敲除的巨噬细胞阻碍C2C12成肌细胞分化
4 讨论
5 结论
本研究创新性的自我评价
参考文献
综述
    参考文献
攻读学位期间取得的研究成果
致谢
个人简历



本文编号：4018164