人参皂甙Rg1调控星形胶质细胞表面蛋白表达及其在脊髓损伤中的意义

发布时间：2025-01-01 02:16

　　目的观察人参皂甙Rg1对体外培养的星形胶质细胞划痕损伤后细胞表面相关蛋白(Nestin,GLT1,NG2,AQP4,GFAP,Vimentin)表达的影响及其可能的分子机制,并探讨其在脊髓损伤修复中的意义,为脊髓损伤的临床治疗提供新的思路。方法从24 h龄SD大鼠脑组织中取材获得星形胶质细胞(astrocyte,AS),进行体外培养、纯化及传代;免疫荧光法检测培养的AS细胞纯度,纯度达95%以上的细胞继续用于后续实验;CCK-8法测定人参皂甙Rg1在10、20、40、80 μg/ml浓度梯度下对AS细胞划伤后活性的影响,得出人参皂甙Rg1对AS作用的最适浓度:划痕法制作体外星形胶质细胞划伤模型,由此设置对照组与实验组(Rg1组),分析观察对比两组细胞损伤后形态学变化及划痕愈合速度;并利用Western blot测定比较AS损伤后其表面蛋白Nestin、GLT1、NG2、AQP4、GFAP、Vimentin表达的变化;再利用PI3K/Akt 信号通路抑制剂 LY294002 干预 Rg1 实验组(Rg1+LY294002 组),Western Blot测定各组中PI3K、p-PI3K、Ak...

【文章页数】：43 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

图２划痕损伤后星形胶质细胞形态变化及划痕区域面积变化（ｘ４００），从左至右??０、１２、２４、４８、７２?ｈ

〇??图１?ＡＳ形态观察及免疫荧光鉴定??Ａ原代培养的ＡＳ：?Ｂ原代培养的ＡＳ?７灭；Ｃ传代后ＡＳ：?Ｄ?ＡＳ的免疫荧光??鉴定（红色为ＧＦＡＰ染色；蓝色为ＤＡＰ丨染色）??

图１?ＡＳ形态观察及免疫荧光鉴定??Ａ原代培养的ＡＳ：?Ｂ原代培养的ＡＳ?７灭；Ｃ传代后ＡＳ：?Ｄ?ＡＳ的免疫荧光??鉴定（红色为ＧＦＡＰ染色；蓝色为ＤＡＰ丨染色）??

人参皂甙Ｒｇｌ调控星形胶质细胞表面蛋〖Ｉ表达及在其在脊髓损伤中的意义?附图??附图??

图３?Ｗｅｓｔｅｒｎ?Ｂｌｏｔ检测ＡＳ表面相关蛋ｆｔ表达及＇定量分析

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图４?Ｒｇｌ对ＰＩ３Ｋ／Ａｋｔ通路蛋白磷酸化的影响

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本文编号：4021899