MiR-503在IL-1β诱导人椎间盘髓核细胞外基质降解中的作用研究

发布时间：2025-01-18 15:41

　　[目的]椎间盘退变(Intervertebral degenerative disc,IVDD)是脊柱退行性疾病的病理基础,引起下腰痛的重要原因。目前,临床上针对IVDD的治疗手段主要以缓解临床症状为主,并不能阻止、延缓或逆转IVDD病理进程,尚无有效的防治措施。IVDD是一个繁琐的过程,它的发生及复发率高且危害大,受多要素、复杂机制调节,对IVDD发生的具体机制尚不清楚。研究证明髓核细胞的凋亡和数量减少会导致细胞外基质合成减少,破坏细胞外基质合成与降解动态平衡,可导致椎间盘退变。在脊柱椎间盘退变的进程中,炎症反应是其一个主要的病理变化,非编码小RNA(MicroRNAs、miRNAs)参与调控细胞的增殖、分化、凋亡和炎症反应。但是,MicroRNAs在炎症反应条件下如何参与调控髓核细胞外基质降解的作用还不完全清楚。因此,本研究旨在:体外培养髓核细胞及构建髓核细胞炎症损伤模型,研究miRNA-503在IL-1β引起的人椎间盘髓核细胞外基质降解中的作用,为防治椎间盘退变提供理论及实验依据。[方法]1.第一部分,(1)收集10例因椎间盘突出症在椎间孔孔镜下摘除的椎间盘髓核标本[Pfirrma...

【文章页数】：69 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

图２．?１?．人髓核细胞甲苯胺蓝染色（１０?Ｘ?）??２．?２?ｑＲＴ－ＰＣＲ检测髄核细胞角蛋白１９ｍＲＮＡ的鉴定结果??

利用甲苯胺蓝可将细胞质内蛋白多糖染成蓝色的特点，我们将髓核细胞爬片??后行甲苯胺蓝染色。染色结果显示甲苯胺蓝为阳性表现，所培养髓核细胞胞浆呈??蓝色，且胞核附近着色程度较深（图２．１），提示所培养髓核细胞合成聚集蛋白??聚糖。苏木素复染，细胞核呈蓝色。??图２．?１?．人髓核细胞....

图１．分离培养的椎间盘髓核细胞形态图（２００Ｘ）??

与其他细胞相接触，２０天细胞呈后放射状、片状，３０天后呈团簇状??生长分布，Ｐ０代髓核细胞胞浆内分泌颗粒较少，Ｐ１代髓核细胞胞浆内分泌颗粒??明显增多。（图１）??——??ｍ：：ｒ?－??■■ＨＩ??２１??

图2.3.1K19扩增曲线图

用ＲＴ－ＰＣＲ检测Ｋ－１９在人的髓核细胞中与人纤维环细胞中的表达情况，与对??照组相比，可以发现人的髓核细胞中的Ｋ－１９显著高表达（Ｐ＜０．?０５）。因此进一??步证实培养的髓核细胞的真实可靠性，为后续细胞实验奠定了基础。??Ｋｅｒａｔｉｎ１９??１５－．??〇??Ｃ?＊＊＊??....

图２．?３．?３?Ｋ１９ｍＲＮＡ在人的髓核细胞中与人纤维环细胞中相比显著高表达

利用甲苯胺蓝可将细胞质内蛋白多糖染成蓝色的特点，我们将髓核细胞爬片??后行甲苯胺蓝染色。染色结果显示甲苯胺蓝为阳性表现，所培养髓核细胞胞浆呈??蓝色，且胞核附近着色程度较深（图２．１），提示所培养髓核细胞合成聚集蛋白??聚糖。苏木素复染，细胞核呈蓝色。??图２．?１?．人髓核细胞....

本文编号：4028805