沉默Ski基因对骨肉瘤U-2OS细胞生物学行为的影响

发布时间：2025-03-19 06:09

　　背景 骨肉瘤起源于间叶组织,是骨关节系统最常见的恶性肿瘤,其治愈率较低,对青少年健康的危害较高,在早期易发生肺部转移,死亡率较高。近年来,随着外科手术的发展和新辅助联合化疗的广泛应用,患者5年生存率得到显著提高,但发生转移的患者5年生存率仍较低。因此,深入探讨骨肉瘤发生转移机制,寻找新的治疗靶点进而延长已发生转移者的生存期是目前亟需解决的问题。Ski基因在不同物种中广泛参与并调节多种细胞的增殖及分化等过程,在生物进化过程中高度保守,参与多种信号通路,且与肿瘤的发生发展、增殖、分化等密切相关。已有研究表明,Ski基因在多种肿瘤组织中呈高表达状态,Ski基因的激活或异常表达与肿瘤的发生发展密切相关。而有关Ski对骨肉瘤细胞增殖和迁移影响的研究在国内外尚无相关报道。目的 探讨沉默Ski基因骨肉瘤U-2OS细胞是否会出现生物学活性的改变。继而研究骨肉瘤病致病机制并对其早期预防、诊断、治疗提供理论依据。方法 实验分为3组:空白对照组(未转染的骨肉瘤细胞)、阴性对照组(转染阴性对照序列)和沉默组(转染Ski-siRNA)。采用脂质体法将特异性针对Ski基因的siRNA和阴性对照siRNA转入骨肉瘤U...

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图3.1Ski在骨肉瘤U-2OS细胞中显示为绿色荧光，主要分布于细胞核和细胞质中（×200）

兰州大学硕士研究生论文沉默Ski基因对骨肉瘤U-2OS细胞生物学行为的影响第三章结果.1Ski在骨肉瘤U-2OS细胞中的表达运用细胞免疫荧光技术检测Ski基因在骨肉瘤U-2OS细胞中的表达分布，并通过倒置荧光显微镜观察成像。首先骨肉瘤U-2OS细....

图3.3沉默ski基因表达对U-2OS细胞增殖活力的影响

显微镜下观察Ski-siRNA转入骨肉瘤U-2OSFITC-control-siRNA转染骨肉瘤U-2OS细胞orphologicalchangesofosteosarcomaU-2theSkispecificsiRNAwereobserved....

图3.2倒置光学显微镜下观察Ski-siRNA转入骨肉瘤U-2OS细胞后细胞形态的变化及荧光显微镜下观察FITC-control-siRNA转染骨肉瘤U-2OS细胞的转染效率（C）

兰州大学硕士研究生论文沉默Ski基因对骨肉瘤U-2OS细胞生物学行为的影响采用FITC-control-siRNA检测转染效率结果显示，将6ulFITC-control-siRNA经8uL的siRNALipofectamineRNAiMAXReag....

图3.4沉默ski基因表达对细胞周期的影响

ontrol-siRNA;Ski-siRNA:U-2OScellstransfectedwiththespecificsiRNAtarene.*P<0.05,vstheNC-siRNAandthemockgroups(n=3)..4沉默Ski....

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