miRNA-137在骨肉瘤中的作用及机制研究
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【摘要】:[目的]通过转染miRNA-137至人骨肉瘤细胞MG-63,观察细胞内TWIST蛋白含量变化及其对细胞增殖活性的影响以探讨miRNA-137在骨肉瘤中的作用及机制。[方法]Target Scan预测miRNA-137与TWIST结合靶位;PCR扩增TWIST基因3’UTR区并克隆至荧光素酶报告基因表达载体;化学法合成miRNA-137 mimics,miRNA-137 inhibitor及NC序列,与荧光素酶报告基因表达载体共转染293细胞,48 h后检测荧光素酶活性;转染miRNA-137至MG-63细胞,转染后48 h,Real Time-PCR检测转染后细胞内miRNA-137含量,Western-blot检测细胞中TWIST蛋白含量变化;转染后0~72 h,CCK-8检测肿瘤细胞增殖活性。[结果]证实了miRNA-137与其靶基因TWIST的结合位点;miRNA-137 mimics转染MG-63细胞,可明显抑制细胞内TWIST蛋白表达,与对照组比较,差异有统计学意义(P0.05),而miRNA-137 inhibitor转染细胞后可明显增强胞内TWIST蛋白的表达,与对照组比较差异有统计学意义(P0.05));miRNA-137 mimics可明显抑制MG-63细胞对数期增殖活性,而miRNA-137 inhibitor则使细胞增殖活性进一步增强,相同时间点与对照相比较,均有差异(P0.05)。[结论]miRNA-137可以通过抑制其靶基因TWIST表达来抑制MG-63细胞增殖活性。
【作者单位】: 解放军第454医院骨科;
【关键词】: miRNA- MG- 荧光素酶 TWIST 细胞活性
【分类号】:R738
【正文快照】: 骨肉瘤是骨肿瘤的一种,临床以恶性较为常见。骨肉瘤患者中有近80%能保留病肢,5年生存率大约为80%,但仍有至少半数的骨肉瘤患者死于肿瘤的转移和复发。随着分子生物学技术的发展,肿瘤靶向基因治疗显示出其良好的临床应用潜力,而且治疗手段不断改进和提高。尽管骨肉瘤的基因研究
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9 朱U
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