建立一种新型凝血因子Ⅴ基因突变小鼠模型:突变小鼠无显著骨组织变化

发布时间：2017-07-31 12:27

  本文关键词：建立一种新型凝血因子Ⅴ基因突变小鼠模型:突变小鼠无显著骨组织变化

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【摘要】：背景:研究显示,凝血因子Ⅴ基因突变在自发性非创伤性股骨头坏死的发生率比健康对照组和继发性非创伤性股骨头坏死高,血栓形成的发生率与此吻合。凝血因子Ⅴ的失活能够加速和促进凝血酶原的激活及凝血酶的生成。其重链上的3个位点arg-306,arg-506,arg-679的突变导致血栓倾向和高凝状态。文章将调查第506位和679位的同时突变R506Q/R679Q对骨坏死产生的功能和影响。目的:建立凝血因子Ⅴ第506位和679位的谷氨酰胺至精氨酸(Factor VR506Q/R679Q)点突变小鼠模型。方法:应用分子克隆技术构建Factor VR506Q/R679Q点突变打靶载体,将其线性化后电转到胚胎干细胞中,然后筛选G418抗性的胚胎干细胞克隆进行胚泡显微注射,将注射好的胚泡移植至同期发情的假孕受体母鼠输卵管内,获得携带双侧LoxP基因的Chimera小鼠。将突变鼠与CMV-cre转基因鼠杂交后,得到只含Factor VR506Q/R679Q的点突变鼠。PCR法进行基因型鉴定后,将突变小鼠和野生小鼠的骨苏木精-伊红染色和空骨陷窝率等进行比较,对其骨组织情况及骨量进行分析。结果与结论:(1)与野生鼠相比,Factor VR506Q/R679Q点突变鼠胚胎及生后的生长发育无明显异常,骨量及空骨陷窝率并无显著变化;(2)结果提示,成功建立了凝血因子Factor VR506Q/R679Q点突变小鼠,但突变小鼠并无显著骨组织变化。之后的研究应关注在外加因素刺激下突变小鼠的骨坏死诱发率。
【作者单位】： 杭州师范大学生命与环境科学学院;石家庄场站医院;石家庄市灵寿县医院泌尿外科;唐山市滦南县医院外一科;
【关键词】： 模型 动物 基因 血液凝固因子 组织工程 组织构建 骨组织工程 基因突变小鼠 凝血因子Ⅴ 显微注射 动物模型 浙江省自然科学基金
【基金】：浙江省自然科学基金(LQ13H060003)~~
【分类号】：R681.8;R-332
【正文快照】： 文章快速阅读: 一种新型凝血因子V基因突变小鼠模型的建立 构变电建载转点体入突并细pR引并B6 l7u亚入9e Qs克cRr点i5p0隆t突6 Q变到载/显注微射准备受精卵准备假孕母鼠m各ic年roC龄T阶骨段量的胞后进行体并筛胚胎移植突变检测 胚胞胎克干隆细筛培养胚胎干细选合嵌体显胎微，

本文编号：599171