玻璃化法冷冻保存兔椎间盘冻存试剂的选择
本文关键词:玻璃化法冷冻保存兔椎间盘冻存试剂的选择
【摘要】:目的:研究玻璃化冻存试剂(cryoprotectant agent,CPA)对于兔髓核细胞的毒性作用,从而为玻璃化冻存椎间盘选择合适的冻存试剂。方法:选取目前最常用的五种玻璃化冻存试剂:二甲基亚砜、甲酰胺、乙二醇、丙二醇、丙三醇,任意两种及三种CPA互相组合成10种2-CPA,10种3-CPA。用CCK-8和FDA/PI两种方法检测髓核细胞的细胞存活率。用统计学方法对所得数据进行统计分析,选出对髓核细胞毒性较小的玻璃化冻存试剂组合方案,并观察所选方案对玻璃化冻存兔椎间盘的保存效果。结果:两种检测方法检测结果基本一致,五种玻璃化试剂对髓核细胞的毒性由小到大依次为:乙二醇、丙三醇、甲酰胺、二甲基亚砜、丙二醇。2-CPA和3-CPA的毒性均比组成该组合溶液的任意一种单一CPA小。组合试剂中,含有乙二醇或丙三醇的2-CPA或3-CPA毒性均较小。玻璃化保存组的兔腰椎间盘髓核细胞存活率和相对活性均优于低温冷冻组。结论:玻璃化冻存椎间盘可选用包含乙二醇和(或)丙三醇的玻璃化组合试剂。
【关键词】:玻璃化 冻存试剂 椎间盘 髓核细胞 存活率
【学位授予单位】:河北医科大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2016
【分类号】:R687
【目录】:
- 中文摘要4-5
- 英文摘要5-6
- 英文缩写6-7
- 前言7-8
- 材料与方法8-12
- 结果12-13
- 附图13-18
- 附表18-19
- 讨论19-23
- 结论23-24
- 参考文献24-27
- 综述 玻璃化法冷冻保存生物细胞、组织和器官的原理分析27-44
- 参考文献37-44
- 致谢44-45
- 个人简历45
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,本文编号:666257
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