山梨醇代谢通路在糖尿病人腰椎管狭窄症发病中的作用机制

发布时间：2017-08-17 03:10

  本文关键词：山梨醇代谢通路在糖尿病人腰椎管狭窄症发病中的作用机制

  更多相关文章： 腰椎管狭窄 山梨醇 糖尿病 黄韧带 醛糖还原酶抑制剂

【摘要】：目的:目前糖尿病(DM)合并腰椎管狭窄(LSCS)患者的黄韧带(LF)增生的病理机制仍不清楚,本课题旨在研究此类患者黄韧带增生的发生机制。方法:本实验将24例糖尿病和20例非糖尿病的腰椎管狭窄患者列为研究对象,研究对象黄韧带标本的结构采用组织学和免疫组化进行观测评估,并且检测分析标本的山梨醇、促炎性细胞因子、成纤维因子及转化生长因子β(TGF-β)的表达水平。在体外实验中使用NIH3T3成纤维细胞,分别检测高糖培养条件及醛糖还原酶抑制剂(ARI)作用对细胞中的山梨醇、促炎因子及TGF-β表达水平的影响。结果:糖尿病患者的黄韧带标本较非糖尿病患者表现出更高的山梨醇、促炎性细胞因子和TGF-β的表达水平,CD68阳性染色率也较非糖尿病患者高。糖尿病患者黄韧带标本的厚度明显比非糖尿病患者更厚,且呈现出明显退变的病理改变。体外实验中,NIH3T3成纤维细胞在高糖培养与正常糖浓度培养条件相比山梨醇、促炎性细胞因子和TGF-β的表达水平更高,而山梨醇、促炎性细胞因子和TGF-β增高的表达水平可被醛糖还原酶抑制剂所抑制并且呈剂量依赖。结论:糖尿病患者黄韧带标本中山梨醇水平的增高导致了促炎因子和促纤维化因子的增加,这促进了黄韧带的炎性增生,并增加了糖尿病患者对腰椎管狭窄的易感性。此外在高糖培养的NIH3T3成纤维细胞中,醛糖还原酶抑制剂能有效地降低山梨醇表达水平及由山梨醇所引致的促炎症因子的表达水平。
【关键词】：腰椎管狭窄 山梨醇 糖尿病 黄韧带 醛糖还原酶抑制剂
【学位授予单位】：南昌大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：R587.2;R687.3
【目录】：

• 摘要3-4
• abstract4-8
• 第1章 前言8-10
• 第2章 材料与方法10-18
• 2.1 实验材料10-12
• 2.1.1 临床资料10
• 2.1.2 分子量Marker10
• 2.1.3 主要生化试剂10
• 2.1.4 培养基、血清及添加剂10-11
• 2.1.5 试剂盒11
• 2.1.6 细胞系11
• 2.1.7 引物11
• 2.1.8 生物信息学分析网站及软件11-12
• 2.1.9 主要仪器及设备12
• 2.2 实验方法12-18
• 2.2.1 细胞学实验12-13
• 2.2.2 组织学试验13-14
• 2.2.3 Real-time PCR14-16
• 2.2.4 山梨醇量化分析16
• 2.2.5 黄韧带厚度测量16
• 2.2.6 Western blot16-17
• 2.2.7 统计学方法17-18
• 第3章 结果18-28
• 3.1 山梨醇在标本的表达水平分析18
• 3.2 黄韧带标本厚度的测量与分析18-19
• 3.3 组织学差异19-21
• 3.4 免疫组化21-22
• 3.5 细胞增殖与周期22-23
• 3.6 山梨醇在NIH3T3细胞的表达与分析23-24
• 3.7 相关基因在糖尿病与非糖尿病组表达的检测与分析24-25
• 3.8 相关基因在不同培养组表达的检测与分析25-26
• 3.9 相关蛋白的表达变化分析26-28
• 第4章 讨论28-30
• 第5章 结论与展望30-31
• 5.1 小结30
• 5.2 展望30-31
• 致谢31-32
• 参考文献32-35
• 攻读学位期间的研究成果35-36
• 综述36-41
• 参考文献39-41

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本文编号：686823