优化肝移植供肝灌流液的基础研究

发布时间：2017-08-27 05:23

  本文关键词：优化肝移植供肝灌流液的基础研究

  更多相关文章： 肝移植 绿茶多酚 溶解氧 低温机器灌注

【摘要】：背景肝移植对于终末期肝病是一个常规的有效治疗手段,虽然有较好的疗效,但是仍然存在很大的挑战。其中供肝短缺就是一个主要的问题。所以扩大供肝范围,如何合理利用边缘供肝,提高供肝质量成为一个紧急迫切的事情。众多实验证明供肝通过机器灌注后可以有效改善供肝质量,提高移植术后生存率。所以现在寻找一种可以增加供肝保存时间以及减少供肝氧自由基、炎症介质的灌流液成为当务之急。本实验通过对临床常用灌流液HTK液中增加绿茶多酚以及溶解氧对大鼠的肝脏进行机器灌注,来研究新型灌流液对于供肝的保护作用。方法绿茶多酚+HTK液改良灌流液：将SD大鼠随机分配成一下两组：(1)HTK对照试验组(n=6); (2) HTK+绿茶多酚(GTP) (60μg/ml)(n=6)。 O2+HTK液改良灌流液：将SD大鼠随机分配成一下两组：(1)HTK对照试验组(n=6); (2) HTK灌流液中持续充气(95%氧气和5%二氧化碳混合气体)(n=6)。对大鼠肝脏进行门静脉以及胆管插管,之后从大鼠中取下,通过门静脉导管与机器灌流系统连接,以5rpm的流速进行灌注。在7个时间点进行灌流液的收集(0h,1h,3h,6h,8h,10h,12h)来检测肝功能(谷丙转氨酶(ALT),谷草转氨酶(AST),乳酸脱氢酶(LDH))以及电解质(Na, K, Cl)。同时我们保留肝组织的一部分为了之后的组织学研究(HE染色)。收集新鲜的肝组织样本保存于-80℃为了之后的研究(丙二醛(MDA),髓过氧化物酶(MPO))。结果通过HTK对照组以及GTP实验组的比较,ALT(8h,10h:p0.05;12h:p0.01), AST(10h:p0.05;12h:p0.01),LDH (lh,3h,6h,8h,10h,12h:p0.05) MPO(p0.05),MDA(p0.01)在对照组中普遍高于实验组。病理学方面HTK对照组炎细胞浸润明显,肝窦及中央静脉充血明显。两组干湿重比没有明显差异。HTK对照组与HTK+O2实验组比较:ALT(6h,8h,10h:p0.05), AST(8h,10h,12h:p0.05), LDH(6h,8h,10h: p0.05) MPO(p0.05),MDA (p0.05)在对照组中普遍高于实验组。病理学方面,HTK对照组炎细胞浸润明显,肝窦及中央静脉充血明显。两组干湿重比没有明显差异。结论在低温机器灌注下绿茶多酚以及溶解氧对于大鼠肝移植中的供肝有保护作用。
【关键词】：肝移植 绿茶多酚 溶解氧 低温机器灌注
【学位授予单位】：浙江大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：R657.3
【目录】：

• 致谢4-5
• 中文摘要5-7
• 英文摘要7-10
• 中英文缩略语10-15
• 前言15-17
• 第一章：绿茶多酚+HTK液改良灌流液17-30
• 材料与方法17-21
• 1 材料17-18
• 1.1 实验动物17
• 1.2 主要试剂17
• 1.3 主要仪器及耗材17-18
• 2 手术方法及取材18
• 3 实验指标测定18-20
• 3.1 肝功能及电解质检测19
• 3.2 病理组织学检查19
• 3.3 丙二醛(MDA)测定19-20
• 3.4 髓过氧化物酶(MPO)测定20
• 3.5 干湿重比测定20
• 4 统计学处理20-21
• 结果21-27
• 1 肝功能及电解质21-23
• 2 组织病理23-25
• 3 MPO25
• 4 MDA25-26
• 5 干湿重比(D/W)26-27
• 讨论27-30
• 第二章：O_2+HTK液改良灌流液30-42
• 材料与方法30-34
• 1 材料30-31
• 1.1 实验动物30
• 1.2 主要试剂30
• 1.3 主要仪器及耗材30-31
• 2 手术方法及取材31-32
• 3 实验指标测定32-33
• 3.1 肝功能及电解质检测32
• 3.2 病理组织学检查32-33
• 3.3 丙二醛(MDA)测定33
• 3.4 髓过氧化物酶(MPO)测定33
• 3.5 干湿重比测定33
• 4 统计学处理33-34
• 结果34-40
• 1 肝功能及电解质34-36
• 2 组织病理36-38
• 3 MPO38
• 4 MDA38-39
• 5 干湿重比(D/W)39-40
• 讨论40-42
• 参考文献42-46
• 综述46-64
• 参考文献56-64
• 作者简历及在学期间主持课题和发表论文64-65

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本文编号：744591