姜黄素抑制NF-κB活化过程对颗粒诱导骨溶解影响的体内实验研究

发布时间：2017-09-03 23:05

  本文关键词：姜黄素抑制NF-κB活化过程对颗粒诱导骨溶解影响的体内实验研究

  更多相关文章： 骨溶解 无菌性松动 姜黄素 小鼠气囊植骨模型 NF-κB c-FOS NFATc1 IκBα p-IκBα

【摘要】：目的:通过探讨姜黄素对NF-κB活化过程的影响,研究姜黄素对聚乙烯颗粒诱导骨溶解的治疗效果及作用机制,为预防和治疗人工关节置换术后假体无菌性松动提供新思路。方法:随机选取30只4周大雄性BALB/c小鼠并建立背部气囊,一周后随机杀死其中10只并取其颅骨片,植入其它小鼠背部气囊,建立小鼠气囊植骨模型。动物模型建立后分为以下4组:空白组(A组)、聚乙烯组(B组)、溶剂组(C组)、姜黄素组(D组)。建模后第一天向空白组气囊内注射1ml生理盐水,其余三组小鼠气囊内注射等量聚乙烯颗粒悬浊液。用DMSO溶解姜黄素,并以玉米油定容,制备浓度为5mg/ml的姜黄素溶液,同时制作不含姜黄素的相同成分溶剂。建模后第2天开始,每天向姜黄素组气囊内注射0.2ml姜黄素溶液(姜黄素用量为50mg/kg/d),向溶剂组气囊内注射等量溶剂,其余两组注射等量生理盐水。21天后处死所有小鼠,取出背部气囊及骨片。行TRAP染色检测骨片中破骨细胞的数量。液氮碾磨法处理气囊组织,分别提取总RNA和总蛋白,QPCR检测c-FOS、NFATc1的mRNA表达水平,行western blot检测气囊组织中IκBα以及p-IκBα的蛋白含量。结果:TRAP染色发现,在聚乙烯组和溶剂组骨片中染色的破骨细胞较多,而空白组和姜黄素组极少或没有染色的破骨细胞。QPCR检测发现,基因表达情况:c-FOS:聚乙烯组溶剂组空白组姜黄素组,前两组与后两组相比,组间差异有统计学意义(P0.01);NFATc1:聚乙烯组溶剂组空白组姜黄素组,前两组与后两组相比,组间差异有统计学意义(P0.01)。western blot检测发现,IκBα蛋白相对灰度值:姜黄素组空白组溶剂组聚乙烯组,前两组与后两组相比,组间差异有统计学意义(P0.01);p-IκBα蛋白相对灰度值:聚乙烯组溶剂组空白组姜黄素组,前两组与后两组相比,组间差异有统计学意义(P0.01)。结论:在小鼠气囊植骨模型中,姜黄素可以通过抑制NF-κB的活化以及c-FOS、NFATc1的表达来抑制超高分子量聚乙烯诱导的骨溶解反应。
【关键词】：骨溶解 无菌性松动 姜黄素 小鼠气囊植骨模型 NF-κB c-FOS NFATc1 IκBα p-IκBα
【学位授予单位】：新疆医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：R687.4
【目录】：

• 摘要5-7
• Abstract7-11
• 缩略语表11-12
• 1 前言12-15
• 2 材料与方法15-25
• 2.1 实验材料15-17
• 2.1.1 实验动物15
• 2.1.2 主要仪器与耗材15-16
• 2.1.3 主要试剂及试剂盒16-17
• 2.2 实验方法17-24
• 2.2.1 超高分子量聚乙烯颗粒悬浊液的制备17
• 2.2.2 姜黄素注射液的制备17
• 2.2.3 小鼠皮下气囊植骨骨溶解模型的建立17-18
• 2.2.4 抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)染色检测骨片中破骨细胞的表达情况18-19
• 2.2.5 QPCR检测各组气囊组织中c-Fos、NFATc1的表达情况19-22
• 2.2.6 western blot检测气囊组织IκBα、p-IκBα 的蛋白表达水平22-24
• 2.3 统计分析24-25
• 3 结果25-29
• 3.1 TRAP染色结果25-26
• 3.2 QPCR结果26-27
• 3.3 western blot灰度值分析27-29
• 4 讨论29-32
• 5 结论32-33
• 参考文献33-36
• 综述36-55
• 1.前言36-37
• 2.通过调节趋化因子-配体-受体系统干扰单核/巨噬细胞向假体部位迁移37-38
• 3.以调节巨噬细胞的极化作用为目标来减轻磨损颗粒诱导的骨溶解38-41
• 3.1 巨噬细胞极化作用的概念38-39
• 3.2 巨噬细胞在无菌性松动中的活化和极化作用39-41
• 3.3 通过调节巨噬细胞的极化作用抑制颗粒诱导的骨溶解41
• 4. 通过直接调节NF-κB抑制磨损颗粒诱导的假体周围骨溶解41-42
• 5.讨论与展望42-44
• 参考文献44-55
• 攻读学位期间主要研究成果55-56
• 致谢56-57
• 导师评阅表57

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