脱脂滴血管基质片段凝胶模型的实验研究

发布时间：2017-09-13 00:11

  本文关键词：脱脂滴血管基质片段凝胶模型的实验研究

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【摘要】：目的:探索寻求一种纯天然物理方法快速有效获取SVF Gel模型,并鉴定模型的生物学特性,从而为提高获取及使用SVF/ADSC的效率提供有效途径。方法:1、SVF Gel模型的建立:获取人结构脂肪。制备前分组。用直二通管连接两个内装10 ml结构脂肪的10 ml螺旋口注射器,以设定的组别即不同体积流率Q和作用时间t进行处理,观察成熟脂肪细胞的破坏率。不同组别SVF Gel活死细胞检测。不同组别SVF Gel中ECM的扫描电镜下观察。流式细胞仪分析不同组别中ADSC、内皮细胞、血液来源细胞各细胞群所占的比例。2、SVF Gel模型的鉴定:SVF及SVF Gel中ADSC的分离及原代培养,体外成脂、成骨定向分化及检测。结果:1、相同体积流率,不同推注时间作用下,脂肪组织中的成熟脂肪细胞破坏程度不同。推注时间越长,破坏的成熟脂肪细胞越多,细胞外基质的破损越严重,但5min作用时,细胞外基质形态基本稳定。不同时间体积流率10 m/s作用下ADSC的量的变化无明显的统计学意义。2、SVF Gel中分离培养出的ADSC具有体外成脂及成骨能力。结论:1、成功构建出SVF Gel模型:体积流率10 m/s,5 min处理结构脂肪可以最大程度的破坏成熟脂肪细胞,得到脱脂滴的血管基质片段凝胶。2、SVF Gel中分离培养出的ADSC具有体外成脂及成骨能力。
【关键词】：脂肪来源干细胞 血管基质片段 细胞疗法 脂肪组织
【学位授予单位】：南昌大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：R622
【目录】：

• 摘要3-4
• ABSTRACT4-9
• 第1章 SVF Gel模型的建立9-20
• 1.1 前言研究背景9-11
• 1.2 材料11-12
• 1.2.1 组织来源11
• 1.2.2 主要仪器设备11
• 1.2.3 主要试剂与耗材用品11-12
• 1.3 方法12-15
• 1.3.1 人脂肪组织的获取12
• 1.3.2 机械处理前分组及准备12
• 1.3.3 机械处理人脂肪组织12-13
• 1.3.4 不同组别SVF Gel中活死细胞检测13
• 1.3.5 不同组别SVF Gel中ECM的扫描电镜下观察13-14
• 1.3.6 流式细胞检测14-15
• 1.4 结果15-18
• 1.4.1 SVF Gel获取流程及结构脂肪和SVF Gel实物获取结果15
• 1.4.2 不同组别SVF Gel中成熟脂肪细胞破坏程度的结果15-16
• 1.4.3 不同组别SVF Gel活细胞数量及细胞浓度统计结果16-17
• 1.4.4 不同组别SVF Gel中细胞外基质破坏程度的结果17
• 1.4.5 不同组别流式细胞分析结果17-18
• 1.5 讨论18-20
• 第2章 SVF Gel模型的鉴定20-25
• 2.1 材料20
• 2.1.1 主要仪器设备20
• 2.1.2 主要试剂与耗材用品20
• 2.2 方法20-22
• 2.2.1 SVF及SVF Gel中的ADSC的分离20-21
• 2.2.2 原代培养21
• 2.2.3 成脂、成骨分化21-22
• 2.2.4 成脂、成骨能力的检测22
• 2.2.5 统计学分析22
• 2.3 结果22-23
• 2.4 讨论23-25
• 第3章 总结与展望25-28
• 3.1 总结25-26
• 3.2 展望：进一步工作方向26-28
• 致谢28-29
• 参考文献29-32
• 攻读学位期间的研究成果32-33
• 综述 脂肪组织结构的完整性对移植后转归影响的研究进展33-42
• 参考文献39-42

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本文编号：840358