过表达Shootin1的骨髓间充质干细胞移植治疗脊髓损伤

发布时间：2017-09-13 20:49

  本文关键词：过表达Shootin1的骨髓间充质干细胞移植治疗脊髓损伤

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【摘要】：背景:为解决骨髓间充质干细胞体内分化效率低的问题,拟联合Shootin1基因修饰,希望能有效提高脊髓损伤区内骨髓间充质干细胞神经分化的能力,增加细胞移植治疗脊髓损伤的效果。目的:探讨过表达Shootin1的骨髓间充质干细胞移植修复脊髓损伤模型大鼠的神经再生能力。方法:(1)通过腺病毒转染48 h,使骨髓间充质干细胞过表达Shootin1;(2)在体外进行神经诱导分化,免疫荧光检测神经巢蛋白(Nestin)与神经元特异性核蛋白(NeuN)的表达;(3)运用改良Allen撞击装置制备脊髓撞击损伤模型,造模后半小时在蛛网膜下腔注射Shootin1转染的骨髓间充质干细胞和未转染骨髓间充质干细胞,脊髓损伤对照组仅进行脊髓损伤手术。脊髓损伤5周后取脊髓样本进行冰冻切片检测神经相关标记。结果与结论:(1)腺病毒转染48 h,免疫荧光与Western Blot检测骨髓间充质干细胞内已成功表达Shootin1蛋白;(2)体外神经诱导分化7 d,3组细胞形态上均发生了变化,Shootin1转染的骨髓间充质干细胞组和未转染骨髓间充质干细胞组Nestin与NeuN的表达差异不明显;(3)脊髓撞击损伤大鼠体内实验发现,与对照组相比,细胞移植组BBB评分增高。移植Shootin1转染的骨髓间充质干细胞组和未转染骨髓间充质干细胞组均有Nestin,NeuN,GFAP,MAP-2,ChAT,SYN表达的升高,神经再生能力增强。(4)实验再次认证了骨髓间充质干细胞移植治疗脊髓损伤的显著性效果,Shootin1蛋白对脊髓损伤后的神经再生及神经功能性恢复起到一定作用,但其对于骨髓间充质干细胞直接移植来说修复差异仍不太明显,优化骨髓间充质干细胞对脊髓损伤的治疗仍需进一步研究。
【作者单位】： 南方医科大学附属深圳宝安医院;深圳市罗湖区中医院;
【关键词】： 脊髓损伤 骨髓 间质干细胞移植 神经再生 组织工程 干细胞 移植 骨髓间充质干细胞 Shootin
【基金】：深圳市科技创新委员会资助项目(JCYJ20130329090921096)~~
【分类号】：R651.2
【正文快照】： 文章快速阅读:上调Shootin1蛋白表达量对脊髓损伤恢复的影响Ad5-Shoootin-EGFP-骨髓间充质干细胞Ad5-EGFP-骨髓间充质干细胞原代骨髓间充质干细胞体外分离Neurobasal+B27(Medium),碱性成纤维生长因子、表皮生长因子、脑源性神经营养因子、维甲酸联合诱导转染Shootin1体外诱导

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