新型氯化锂复合磷酸钙骨水泥对成骨细胞增殖及分化的影响

发布时间：2017-09-23 05:29

  本文关键词：新型氯化锂复合磷酸钙骨水泥对成骨细胞增殖及分化的影响

  更多相关文章： 氯化锂 磷酸钙骨水泥 MC3T3-E1细胞 增殖分化 骨组织工程

【摘要】：目的：研究氯化锂复合磷酸钙骨水泥(Lithium doped calcium phosphate cement, Li/CPC)的理化性质及体外生物活性,初步探究Li/CPC对成骨细胞增殖、分化能力的影响。方法：材料学实验：以磷酸钙骨水泥(Calcium phosphate cement, CPC)为空白对照组,不同锂含量的Li/CPC为实验组,检测各组骨水泥理化性能及体外生物活性。用Gillmore双针法测定骨水泥的初凝时间及终凝时间,用显微CT (Micro-computed tomography, Micro-CT)检测材料的孔径分布和孔隙率,用电子动静态万能材料试验机检测材料的抗压强度,用扫描电子显微镜(Scanning electron microscope, SEM)观察材料的微观形貌,使用X射线衍射法(X-ray deffractometer, XRD)和傅里叶变换红外光谱法(Fourier-transform infrared spectroscopy, FTIR)检测材料的组成成分及结构。细胞学实验：将骨水泥材料与MC3T3-E1细胞在体外共培养,用SEM观察细胞在骨水泥表面的粘附和生长形态,用荧光电子显微镜观察细胞骨架蛋白的染色,用CCK-8法检测细胞增殖能力,用碱性磷酸酶(Alkaline phosphatase, ALP)检测试剂盒检测ALP活性,用ALP染色和茜素红染色法观察细胞成骨分化及细胞外基质矿化能力,用RT-PCR方法检测Ⅰ型胶原(COLL-1).骨钙素(OCN)、骨保护素(OPG)、p-连环蛋白(p-Catenin)等成骨相关基因mRNA的表达情况。结果：材料学实验：锂的掺杂未明显改变CPC的理化性质,包括凝固时间、孔径分布和孔隙率、抗压强度、组成成分及微观形貌。细胞学实验：SEM结果表明MC3T3-E1细胞能够很好地在材料表面粘附生长,荧光显微镜下观察Li/CPC组细胞骨架较为饱满,肌动蛋白较伸展,CCK-8实验表明Li/CPC能够促进成骨细胞增殖,ALP活性、ALP染色和茜素红染色结果表明Li/CPC能够促进成骨细胞的分化及矿化,基因检测结果表明Li/CPC能够促进成骨细胞成骨相关基因的表达。结论：Li/CPC保持了CPC优良理化性能,具有良好的体外生物活性和骨传导性；Li/CPC能够促进成骨细胞的增殖及分化,具有一定的促成骨活性；将糖原合成酶激酶-3β(GSK-3β, Glycogen synthase kinase-3β)无机离子抑制剂氯化锂(Lithium chloride, LiCl)加入CPC或许是骨组织工程研究一个新的方向。
【关键词】：氯化锂 磷酸钙骨水泥 MC3T3-E1细胞 增殖分化 骨组织工程
【学位授予单位】：广西医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：R687
【目录】：

• 个人简历3-5
• 中文摘要5-7
• 英文摘要7-10
• 前言10-13
• 第一章 氯化锂复合磷酸钙骨水泥的制备及理化性能检测13-26
• 1、材料13-14
• 2、方法14-18
• 3、结果18-22
• 4、讨论22-26
• 第二章 氯化锂复合磷酸钙骨水泥对成骨细胞增殖及分化的影响26-42
• 1、材料26-27
• 2、方法27-34
• 3、结果34-39
• 4、讨论39-42
• 参考文献42-50
• 中英文缩略词表50-52
• 综述52-75
• 参考文献68-75
• 致谢75-76
• 攻读硕士学位期间发表的学术论文76

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本文编号：903471