微粒皮移植治疗皮肤色素脱失相关问题的实验研究

发布时间：2017-09-25 00:17

  本文关键词：微粒皮移植治疗皮肤色素脱失相关问题的实验研究

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【摘要】：目的：1.通过观察不同剪切时间下微粒皮形态和活力的比较,来确定微粒皮移植中最佳的剪皮时间；2.在裸鼠背部表皮内注射一定浓度培养好的入表皮黑色素细胞,观察其局部是否出现色素区,该区域能否随时间扩大,最大扩展范围等,为临床应用积累理论依据。方法：第一部分：不同剪切时间下微粒皮形态和活力的比较随机选取患者8名.每名选取大腿外侧刃厚皮(电动刀刻度定为厚0.25mmm)5cm2,切割成五等分,每份1cm2·,其中4份剪成微粒,剪切时间分别为5、10、15、20分钟,另一份不剪,作为正常对照组。然后对各组进行组织琥珀酸脱氢酶(SDH)和氧耗量的测定。测定完毕后,送部分组织作常规HE染色.第二部分：人表皮黑色素细胞裸鼠皮内注射后皮肤组织学的初步观察细胞实验：购买美国ScienCell公司的人表皮黑色素细胞-深色(HEM-d)原代细胞,复苏并培养、传代、冻存等,在倒置相差显微镜观察HEM-d原代及各代细胞的形态并拍照；首批细胞主要用来观察和积累培养经验。第二批HEM-d,原代细胞复苏并传为一代后,一部分细胞用来做动物实验,另一部分细胞继续传代培养.动物实验：雄性SPF级裸鼠(BALB/c-nu)5只,背部表皮下注射培养良好的HEM-d一代细胞,此注射的为含有培养基的细胞,浓度为4×104个/ml；设置对照试验,皮下注射HEM-d的完全培养基.注射后连续观察裸鼠表皮是否出现色素变化,色素区域是否随时间扩大;并分别于第1d、15d、30d、60d取注射细胞部位的全层皮肤,于4%多聚甲醛溶液中固定保存,做HE染色,在显微镜下观察黑色素细胞或黑色素颗粒是否存在及其存在的位置。结果：1.微粒皮剪切有个最佳时间点,时间过长微粒皮的活力逐渐减低。2.人表皮黑色素细胞-深色(HEM-d)注射裸鼠表皮内能够使其皮肤显黑色,HE染色显示裸鼠表皮内存在黑色素细胞,且注射后的细胞已成活,黑色着色区域实验期间内逐渐扩大。结论：1.微粒皮剪切有一个最合适的时间,剪切时间过长,颗粒大小变化不大,但其活力逐渐降低。2.体外培养的人表皮黑色素细胞注射裸鼠表皮内能够使其皮肤显黑色,并随着时间逐渐变大;HE染色可见种植部位黑色素细胞形态正常。这为临床实践提供了理论依据。
【关键词】：微粒皮 琥珀酸脱氢酶 氧耗 黑色素细胞 细胞注射
【学位授予单位】：中国人民解放军医学院
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：R622
【目录】：

• 英文缩略词表5-6
• 中文摘要6-8
• ABSTRACT8-10
• 第一部分：不同剪切时间下微粒皮形态和活力的比较10-16
• 前言10
• 材料与方法10-12
• 结果12-14
• 讨论14-15
• 参考文献15-16
• 第二部分：人表皮黑色素细胞裸鼠皮内注射后组织学的初步观察16-26
• 前言16
• 材料与方法16-21
• 结果21-24
• 讨论24
• 参考文献24-26
• 全文总结26-28
• 文献综述28-41
• 参考文献36-41
• 攻读学位期间发表文章情况41-42
• 致谢42

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本文编号：914280