心脏不停跳二尖瓣置换术对心肌Caspase-3与Caspase-12表达影响及CSE在心肌缺血后表达研究

发布时间：2017-09-26 12:08

  本文关键词：心脏不停跳二尖瓣置换术对心肌Caspase-3与Caspase-12表达影响及CSE在心肌缺血后表达研究

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【摘要】：目的：研究体外循环(cardiopulmonary bypass, CPB)心脏不停跳(beating heart, BH)手术与心脏停跳(cardiac arrest, CA)手术对心肌缺血缺氧再灌注损伤(myocardial ischemia-reperfusion injury, MIRI)的程度的影响及心肌细胞凋亡程度的区别研究,同时观察凋亡蛋白酶(cysteine-containing aspartate-specific protease, Caspase)家族成员中Capsase-3与Caspase-12在不同手术中表达差异对其介导心肌细胞凋亡的影响,同时对心肌在缺血后通过胱硫醚-γ-裂解酶(cystathionine-y-lyase, CSE)表达产生的保护机制进行简单探讨,为今后心脏手术心肌保护方面提供临床依据与新的思路。方法：选取广西医科大学第一附属医院40例风湿性心脏病(rheumatic heart disease, RHD)二尖瓣狭窄(mitral stenosis, MS)患者根据手术方式随机分为心脏不停跳组(BH组,n=20)与心脏停跳组(CA组,n=20),分别接受CPB下心脏不停跳与停跳二尖瓣置换术(mitral valve replacement, MVR)。BH组仅作上、下腔静脉的阻断而不阻断主动脉灌注停跳液,分别于CPB开始前(T0)、主动脉阻断后30min(BH组取相应时间,T1)、缝合右心房(T2)时收取右心房心肌组织,应用逆转录聚合酶链式反应(reverse transcriptase polymerase chain reaction,rt-PCR)检测两组心肌Caspase-3、Caspase-12、CSE表达水平,应用免疫组织化学染色(immunohistochemistry)方法对两组心肌切片染色观察Caspase-3与Caspase-12表达情况,同时使用TUNEL法检测两组心肌的细胞凋亡情况。记录两组患者术中CPB转流时间、腔静脉阻断时间、主动脉阻断(BH组相对应)时间、主动脉开放至右心房缝合(简称停机后)时间等资料及术后呼吸机通气时间、住院时间等临床资料；记录两组患者术前与术后超声心动图包括二尖瓣瓣口面积(mitral valve area, MVA)、二尖瓣跨瓣压差(mitral transvalvular pressure,MTP)心搏出量(cardiac output,CO)、射血分数(ejection fraction,EF)、左房横径(left atrial diameter,LAD)、左室舒张末径(left ventricular end-diastolic diameterLVEDD)、左室舒张末容积(left ventricular end-diastolic volume,LVEDV)等。采用SPSS17.0统计学软件处理所收集的相关数据,统计学数据比较中以P0.05为差异具有统计学意义。结果：(1)40例患者均康复后出院,BH组在CPB转流时间、腔静脉阻断时间、呼吸机通气时间均少于CA组(P0.05)；两组术后MVA、 MTP、CO、LAD、LVEDV以及BH组EF较术显著改善(P0.05)；BH组在CO、EF中改善效果强于CA组(p0.05)。(2)BH组Caspase-3在T2时表达量增高(P0.05),CA组在T1时间段有少量表达,在T2时间段表达量显著提高(P0.05)；CA组Caspase-3表达量在T2时间段明显高于BH组(P0.05)。BH组Caspase-12在T2时间段表达量增高(P0.05),CA组中在T1时间段表达增多,在T2时表达量显著提高(P0.05)；CA组Caspase-12表达量在T1、T2时间段明显高于BH组。BH组中CSE在T2时间段表达量升高(P0.05),CA组中在T1时间段表达增多,在T2时间段表达量显著降低(P0.05)；CA组CSE表达量在T1时间段明显高于BH组,而在T2时低于BH组(P0.05)。(3)两组Caspase-3在T2时间段阳性着色数增高(P0.05),CA组在T2时间段阳性着色数明显高于BH组(P0.05)；两组Caspase-12在T2时间段阳性着色数均增高(P0.05),CA组在时T2时间段阳性着色数明显高于BH组(P0.05)。(4)两组心肌细胞在T2时间段均出现了不同程度的凋亡,且CA组心肌细胞凋亡指数明显高于BH组(P0.05)。结论：(1)心脏不停跳二尖瓣置换术相对于心脏停跳手术在体外循环转流时间、呼吸机辅助通气时间低于停跳手术,且较停跳手术能更好提高与改善心脏射血分数以及心排血量。(2)心脏不停跳二尖瓣置换术可能通过降低Caspase-3与Caspase-12参与的凋亡路径表达减轻心肌缺血再灌注损伤引起的心肌细胞凋亡,提高心肌保护作用。(3)CSE在心肌缺血缺氧后表达增高可能在缺血缺氧后心肌自身保护机制中具有重要的作用。
【关键词】：心脏不停跳 心肌保护 心肌缺血再灌注损伤 Caspase-3 Caspase-12 胱硫醚-γ-裂解酶
【学位授予单位】：广西医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：R654.2
【目录】：

• 个人简历3-6
• 中文摘要6-9
• 英文摘要9-12
• 前言12-16
• 参考文献14-16
• 1 主要设备及实验试剂16-18
• 1.1 主要手术设备及器材16
• 1.2 主要实验仪器16-17
• 1.3 主要药品及实验试剂17-18
• 2 临床资料与实验方法18-28
• 2.1 研究对象及分组18
• 2.2 临床资料与标本收集18-20
• 2.3 实时荧光定量PCR检测20-25
• 2.4 免疫组织化学发检测25-26
• 2.5 TUNEL法检测心肌细胞凋亡26-27
• 2.6 统计学方法27-28
• 3 结果28-35
• 3.1 两组手术患者术中及术后临床资料比较28-29
• 3.2 Caspase-3、Caspase-12、CSE在不同时间段mRNA表达结果29-31
• 3.3 各组Caspase-3、Caspase-12在心肌细胞免疫组化染色结果31-33
• 3.4 两组心肌细胞凋亡结果33-34
• 3.5 相关性分析34-35
• 4 讨论35-44
• 5 结论44-45
• 参考文献45-52
• 综述52-67
• 参考文献60-67
• 中英文缩略词表67-69
• 致谢69-70
• 攻读硕士学位期间发表的学术论文目录70

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本文编号：923404