椎间盘退变时髓核细胞中锌指蛋白A20及相关炎症因子的表达变化研究

发布时间：2017-09-30 11:02

  本文关键词：椎间盘退变时髓核细胞中锌指蛋白A20及相关炎症因子的表达变化研究

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【摘要】：目的:检测锌指蛋白A20(zinc finger protein A20)在人退变椎间盘髓核中的表达、并在体外以内毒素(LPS)刺激胚胎小鼠髓核细胞,进一步观察了锌指蛋白A20和其他相关炎症因子的表达变化。方法:采用阿辛蓝染色观察人椎间盘髓核细胞的退变情况、以免疫组化观察人椎间盘髓核细胞A20、TNF-α、IL-1β及p65的表达;体外培养胚胎小鼠髓核细胞,以LPS刺激细胞以及加入NF-κB抑制剂,分别观察了LPS对胚胎小鼠髓核细胞的细胞毒性作用;以Real-time PCR检测刺激细胞后,A20、TNF-α、IL-1β、I型血小板结合蛋白基序的解聚蛋白样金属蛋白酶-4(ADAMST-4)、I型血小板结合蛋白基序的解聚蛋白样金属蛋白酶-5(ADAMST-5)、基质金属蛋白酶-13(MMP-13)的表达变化;以Western Blot观察A20、TNF-α、IL-1β、ADAMTS-4、ADAMTS-5、MMP-13、p65、磷酸化p65(p-p65)的表达变化。结果:结果显示:人退变椎间盘髓核细胞数量减少、出现聚集现象;髓核细胞中A20、TNF-α、IL-1β、p65表达明显高于正常组;LPS刺激胚胎小鼠髓核细胞后,A20、TNF-α、IL-1β、ADAMST-4、ADAMST-5、MMP-13 mRNA的表达均高于NF-κB抑制组与对照组(P0.05);A20、TNF-α、IL-1β、ADAMTS-4、ADAMTS-5、MMP-13、p65、p-p65蛋白含量也较NF-κB抑制组与对照组也显著增高(P0.05)。结论:椎间盘退变时A20表达增加,LPS刺激时,胚胎小鼠髓核细胞中A20和炎症因子表达增加,NF-κB活性抑制前后差异显著,提示髓核细胞的炎症反应与椎间盘退变的发生发展可能密切相关,而A20在其中可能发挥了重要作用。
【关键词】：椎间盘退变 髓核细胞 锌指蛋白A20 炎症反应 NF-κB
【学位授予单位】：重庆医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：R681.5
【目录】：

• 英汉缩略语名词对照4-5
• 中文摘要5-7
• 英文摘要7-10
• 前言10-14
• 参考文献12-14
• 第一部分 人椎间盘髓核组织中锌指蛋白A20及相关炎症因子表达变化14-22
• 1 材料与方法14-16
• 2 结果16-19
• 3 讨论19-21
• 参考文献21-22
• 第二部分LPS刺激髓核细胞后锌指蛋白A20及相关炎症因子表达变化22-39
• 1 材料和方法22-30
• 2 结果30-34
• 3 讨论34-37
• 参考文献37-39
• 全文总结39-40
• 文献综述40-46
• 参考文献43-46
• 致谢46-47
• 攻读硕士学位期间发表的学术论文47

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前3条

1 顾韬;阮狄克;;生物力学因素对椎间盘退变的影响及机理[J];中国脊柱脊髓杂志;2011年06期

2 唐淼;陈惠德;张文芽;陈和木;;TNF-α、IL-1β在退变颈椎间盘的表达和意义[J];安徽医药;2011年02期

3 赵序利;椎间盘退变的病因研究[J];中国矫形外科杂志;2002年03期

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本文编号：947799