钙蛋白酶小亚基Capn4在鼻咽癌细胞CNE2中DNA损伤修复的作用
发布时间:2018-05-27 10:08
本文选题:Capn + 鼻咽癌 ; 参考:《中国临床解剖学杂志》2017年03期
【摘要】:目的研究钙蛋白酶小亚基Capn4对放射所致的鼻咽癌细胞CNE2在DNA损伤修复中的作用及可能影响的修复通路。方法选取鼻咽癌细胞CNE2与293T细胞在37℃、5%CO_2条件下培养,Western blot法检测Capn4在不同细胞中蛋白表达水平;构建sh RNA下调Capn4表达的CNE2细胞并以Western blot法验证;高内涵细胞成像分析仪分析γ-H2AX在放射后的CNE2细胞及下调Capn4表达的CNE2细胞中的平均荧光强度;非同源末端连接(NHEJ)通路特异性的质粒EJ5-GFP用Fugen6 HD转入空载的CNE2细胞及下调Capn4的CNE2细胞,用高内涵细胞成像分析仪检测GFP的阳性率,观察下调Capn4对放射诱导的鼻咽癌细胞DNA损伤NHEJ修复通路的影响。结果 Capn4在鼻咽癌细胞系中表达明显高于正常细胞(P0.01);sh RNA确实下调Capn4在鼻咽癌细胞中的表达;下调Capn4表达对放射造成的CNE2细胞DNA损伤修复有抑制作用(P0.01);下调Capn4表达能够抑制CNE2细胞DNA损伤后NHEJ通路的修复(P0.01)。结论 Capn4在鼻咽癌细胞CNE2中高表达,下调Capn4的表达能抑制放射所致的DNA损伤修复,这种作用可能是通过抑制NHEJ通路实现的。
[Abstract]:Objective to investigate the role of calpain small subunit Capn4 in the repair of DNA damage in nasopharyngeal carcinoma (NPC) cells induced by radiation and its possible effects on the repair pathway. Methods CNE2 and 293T cells were cultured at 37 鈩,
本文编号:1941577
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