TGF-β1诱导鼻咽癌细胞上皮—间质转化的研究
本文选题:TGF-β1 + 鼻咽癌 ; 参考:《华中科技大学》2012年硕士论文
【摘要】:目的鼻咽癌是中国南部最常见的头颈部肿瘤之一,大部分患者死于转移。研究表明上皮-间质转化(epithelial-mesenchymal transition, EMT)是促进肿瘤侵袭转移的重要机制。转化生长因子β1(transforming growth factor beta-1,TGF-β1)已被证实为EMT的主要诱导剂。本实验目的是探讨TGF-β1是否可以诱导鼻咽癌细胞CNE-1发生EMT以及对鼻咽癌细胞的运动侵袭能力的影响。 方法将体外培养的鼻咽癌细胞CNE-1用10ng/mL TGF-β1干预不同时间后,倒置显微镜观察细胞形态学变化;Western Blot、细胞免疫荧光及实时定量RT-PCR分别检测上皮标志物E-cadherin,间质标志物N-cadherin和转录因子Slug基因和蛋白表达变化;划痕实验及Transwell实验检测细胞迁移及侵袭能力变化。 结果倒置显微镜观察到TGF-β1干预后CNE-1细胞形态由鹅卵石样外观变为长梭形;Western Blot、免疫荧光和定量RT-PCR显示上皮标志蛋白E-cadherin表达下调,间质标记蛋白N-cadherin以及转录因子Slug的表达上调;此外,CNE-1细胞迁移和侵袭能力增强。 结论TGF-β1诱导鼻咽癌CNE-1细胞发生EMT并增强其迁移及侵袭能力。
[Abstract]:Objective Nasopharyngeal carcinoma is one of the most common head and neck tumors in southern China. It has been shown that epithelial-mesenchymal transition is an important mechanism to promote tumor invasion and metastasis. Transforming growth factor 尾 1 (transforming growth factor beta-1 TGF- 尾 1 has been confirmed as the main inducer of EMT. The aim of this study was to investigate whether TGF- 尾 1 could induce EMT in nasopharyngeal carcinoma (NPC) cell line CNE-1 and its effect on the motor invasion of nasopharyngeal carcinoma cell line CNE-1. Methods the cultured nasopharyngeal carcinoma cell line CNE-1 was treated with 10 ng / mL TGF- 尾 1 for different time. The morphological changes of CNE-1 cells were observed by inverted microscope. The expression of E-cadherin, N-cadherin, Slug gene and protein were detected by Western blot, cell immunofluorescence and real-time quantitative RT-PCR, and the changes of cell migration and invasion ability were detected by scratch test and Transwell assay. Results the morphology of CNE-1 cells after TGF- 尾 1 intervention was changed from pebble-like appearance to fusiform Western blot. Immunofluorescence and quantitative RT-PCR showed that the expression of E-cadherin, the expression of N-cadherin, and the transcription factor Slug were down-regulated, and the expression of N-cadherin and Slug were up-regulated. In addition, the migration and invasion of CNE-1 cells were enhanced. Conclusion TGF- 尾 1 induces EMT and enhances migration and invasion of CNE-1 cells.
【学位授予单位】:华中科技大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2012
【分类号】:R739.63
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