低频强噪声对巴马香猪内耳损伤及机制研究

发布时间：2018-11-03 08:40

【摘要】：目的：建立经低频强声暴露的巴马香猪噪声性耳聋模型。通过对巴马香猪低频强声暴露后不同时刻行听性脑干反应(Auditory Brainstem Response, ABR)检测、观察其行为学变化、前庭结构及耳蜗毛细胞表面结构形态、内耳凋亡因子天冬氨酸特异性的半胱氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)免疫组织化学及免疫荧光染色,了解正常组巴马香猪耳蜗内、外毛细胞形态变化,低频强声对巴马香猪听功能损伤程度、耳蜗毛细胞表面结构及前庭器官形态的影响及内耳凋亡因子的表达。初步观察低频强声对巴马香猪位听器官损伤特点,探讨其损伤产生的相关机制。方法：将8只巴马香猪随机分为对照组(2只)及实验组(6只),均于实验前行听性脑干反应检测,将实验组再随机分为暴露后即刻组、暴露后36小时组及暴露后84小时组,每组2只。实验组动物暴露于50Hz,142dBSPL的低频噪声中5分钟,再分别于暴露后即刻、暴露后36小时及暴露后84小时观察行为学变化,并行ABR检测,然后在扫描电镜下观察各组动物耳蜗毛细胞表面结构及前庭器官的形态变化；用免疫组织化学染色检测各组动物内耳相应结构上Caspase-3的表达；用免疫荧光4',6--二脒基-2-苯基吲哚二盐酸盐(DAPI)标记细胞核方法进一步观察证实毛细胞胞质中Caspase-3的表达情况,同时通过细胞计数方法计算毛细胞缺失率以判定细胞死亡情况。对照组巴马香猪除不暴露于噪声环境外,其他与实验组巴马香猪处理相同。结果：8只(16耳)巴马香猪低频强声暴露前ABR阈值为91.25±10.72 dBSPL;实验组所有动物低频强声暴露后双耳ABR阈值均未能引出。实验动物在强声暴露过程中多安静不动,暴露后即刻出现短暂站立、行走不稳,未见眼震；暴露后第2天巴马香猪活动基本恢复正常,但活跃程度仍有所下降；实验组动物球囊斑及椭圆囊斑扫描电镜下耳石及感觉细胞的纤毛未见明显异常。噪声暴露后即刻组扫描电镜下可见内、外毛细胞气球样变,外毛细胞静纤毛融合及散在性缺失；噪声暴露后36小时组可见内、外毛细胞轻度气球样变及其静纤毛散乱；噪声暴露后84小时组耳蜗基底回可见内、外毛细胞缺失,中回及顶回内、外毛细胞静纤毛缺失且以第三排外毛细胞静纤毛缺失最重。噪声暴露后毛细胞表面结构损伤以基底回及中回为主,顶回损伤较轻。巴马香猪耳蜗各部位均可见Caspase-3阳性表达,随着暴露后时间延长,Caspase-3阳性表达逐渐减弱。免疫荧光方法可见噪声暴露后即刻组、暴露后36小时组与正常对照组相比较,三排外毛细胞排列及层次明显错乱；同时免疫荧光染色可见噪声暴露后84小时组三层外毛细胞消失,仅可见一层内毛细胞。结论：经50Hz,142dBSPL低频强声暴露后,巴马香猪双耳听功能受损;内耳结构出现凋亡及机械性损伤。低频强噪声对巴马香猪听功能的损伤符合损伤随着噪声强度的增强而增强的特点。低频强声在损伤毛细胞的同时亦可诱导螺旋神经节的凋亡。
[Abstract]:......
【学位授予单位】：中国人民解放军医学院
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：R764.43

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本文编号：2307279