LED光源对人视网膜色素上皮细胞分泌NF-κB、MCP-1、IL-8的影响

发布时间：2018-12-05 21:04

【摘要】：目的观察LED光源对人视网膜色素上皮(RPE)细胞增生及分泌核转录因子-kappa B(NF-κB)、单核细胞趋化因1(MCP-1)和白介素8(IL-8)的影响。方法传代培养的人RPE细胞分别置于300lux、500lux、1000lux的LED白光、蓝光、绿光,分别照射6h、12h、18h、24h,分别设置对照组避光培养。采用MTT法检测细胞增生值(A460);免疫细胞化学(ICC)法检测1000lux LED白光、蓝光、绿光照射6h、12h、24h后NF-κB、IL-8的表达;使用real-time PCR(RT-PCR)检测各组细胞NF-κB、MCP-1和IL-8m RNA相对表达量,酶联免疫吸附实验(ELISA)检测各组细胞分泌NF-κB、MCP-1和IL-8蛋白含量。结果1.MTT法检测细胞增生值显示300lux、500lux、1000lux绿光组细胞A460值组间比较差异均无统计学意义(P0.05),各组总体均数与对照组比较差异均无统计学意义((P0.05),300lux、500lux、1000lux蓝光、白光各组组间比较差异均有统计学意义(P0.05),其中白光300lux 24h,500lux 18h、24h,1000lux 12h、18h、24h,蓝光300lux 18h、24h,500lux和1000lux 6h、12h、18h、24h各组细胞增生值与对照组比较差异均有统计学意义(P0.05)。细胞增生值随着白光、蓝光光照强度及光照时间的增加,细胞增生能力逐渐下降。2.免疫细胞化学结果显示,LED光源对RPE细胞NF-κB、IL-8的影响主要位于胞浆1000lux蓝光照射细胞后NF-κB、IL-8表达量较LED白光,绿光高。3.RT-PCR结果显示白光、蓝光、绿光300lux、500lux、1000lux各光照组NF-κB m RNA总体均数比较差异有统计学意义(P0.05)。其中白光300 lux 18h、24h,500lux 18h、24h、1000lux 12h、18h、24h,蓝光300lux 12h、18h、24h,500lux12h、18h、24h,1000lux 6h、12h、18h、24h,绿光300 lux 24h、500lux 24h、1000lux 18h、24h,各组NF-κB m RNA表达量与对照组比较差异均有统计学意义(P0.05)。绿光300lux组MCP-1、IL-8总体均数比较差异均无统计学意义(P0.05),白光、蓝光300lux、500lux、1000lux各光照组及绿光500lux、1000lux各光照组MCP-1m RNA总体均数比较差异均有统计学意义(P0.05)。其中白光500lux 24h、1000lux 12h、18h、24h,蓝光300lux 18h、24h,500lux 12h、18h、24h,1000lux12h、18h、24h,绿光500lux 24h、1000lux 24h,各组MCP-1、IL-8m RNA表达与对照组比较差异均有统计学意义(P0.05)。4.ELISA结果显示,白光、蓝光、绿光各组NF-κB、MCP-1和IL-8分泌量总体均数比较差异均有统计学意义(P0.05),白光300lux 18h、24h,500lux 18h、24h,1000lux 12h、18h、24h,蓝光300 lux 12h、18h、24h,500lux 12h、18h、24h,1000lux 6h、12h、18h、24h,绿光300 lux 24h,500 lux 24h、1000 lux 18h、24h各组NF-κB分泌量较对照组增加,差异均有统计学意义(P0.05)。各组随着光照时间的延长,NF-κB分泌量增加,在24h达到最高值。白光300lux 18h、24h,500lux 18h、24h,1000lux 12h、18h、24h,蓝光300 lux 18h、24h,500lux12h、18h、24h,1000lux 12h、18h、24h,绿光500 lux 24h、1000 lux 18h、24h各组与对照组相比MCP-1、IL-8分泌量较对照组增加,差异均有统计学意义(P0.05)。结论白色、蓝色LED光源照射体外培养的人视网膜色素上皮细胞达到一定照度及时间后可以影响细胞的增殖能力;白色、蓝色、绿色LED光源照射体外培养的人视网膜色素上皮细胞引起炎性因子NF-κB、MCP-1和IL-8的表达和分泌增加,在一定光照强度及时间范围内,存在光照强度及时间依赖性,蓝色LED光源更为显著。
[Abstract]:......
【学位授予单位】：天津医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：R774.1

【参考文献】

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本文编号：2365467