外源性硫化氢对大鼠视网膜缺血再灌注损伤的保护作用

发布时间：2019-07-19 14:16

【摘要】：目的 探讨硫化氢对实验性大鼠视网膜缺血再灌注损伤（retinalischemi-reperfusioninjury,RIRI)后细胞凋亡及Bcl-2、Bax蛋白表达的影响。 方法 通过前房灌注升高眼压的方法，制作大鼠实验性视网膜缺血再灌注损伤（RIRI）的模型。以硫氢化钠（NaHS）作为硫化氢的供体。将54只正常无眼疾的SD大鼠随机分为正常组、缺血再灌注模型组（IR组）和硫氢化钠干预组（IR+NaHS组）。后两组再各分为再灌注后6h、24h、48h、72h四个时间段。光镜观察视网膜组织形态学变化，采用DNA原位末端标记（terminal dUTP nick endlabeling,TUNEL）法定位凋亡的视网膜细胞；免疫组织化学染色法检测视网膜组织中Bcl-2、Bax蛋白的表达变化。 结果 正常组大鼠视网膜组织结构清晰完整，，细胞排列整齐，未见凋亡细胞。缺血再灌注组随再灌注时间延长，视网膜的损害逐渐加重，内层开始出现水肿、间质逐渐变薄并且层次开始不清，RGC层和内核层细胞排列疏松而紊乱。部分细胞核固缩、溶解、坏死、胞浆空泡样变，48h后水肿减轻，72h后视网膜结构基本恢复正常，视网膜较前变薄。IR+NaHS组视网膜组织学变化趋势与IR组相似，但视网膜水肿、间质变薄程度、细胞丢失、核固缩及空泡样变均有明显改善。TUNEL检测于再灌注6h可观察到凋亡细胞，随着再灌注时间延长凋亡细胞逐渐增加，24h细胞凋亡达高峰，48h后凋亡细胞逐渐减少，72h仍然有阳性表达。Bcl-2、Bax蛋白在正常视网膜组织中几乎不表达，Bcl-2蛋白在缺血再灌注6h组视网膜中有较高表达，全层均可见，再灌注24h表达明显下降，再灌注48h表达继续下降，再灌注72h仍有表达。Bax蛋白在缺血再灌注6h组视网膜中开始表达，再灌注24h表达达到高峰，再灌注48h表达明显降低，72h组表达进一步降低，但仍呈现高表达。硫氢化钠干预组，各观察指标变化趋势基本与缺血再灌注组相似，凋亡指数及Bax蛋白阳性表达均较缺血再灌注组明显下降，Bcl-2蛋白阳性表达均较缺血再灌注组明显升高，两组间比较差异均有统计学意义（P0.05）。 结论 缺血再灌注过程主要对视网膜内层造成损害，Bcl-2和Bax参与了视网膜缺血再灌注损伤的形成，硫化氢可上调Bcl-2蛋白及下调Bax蛋白在视网膜缺血再灌注损伤中的表达、升高Bcl-2/Bax比值从而抑制细胞凋亡，来实现对大鼠视网膜缺血再灌注损伤的保护作用。
【图文】：

17图 2（IR6h 组，视网膜 HE 染色， 图 6（IR+NaHS6h 组，视网膜 HE 染×400） 色，×400）视网膜水肿，丛状层疏松增厚，GCL 视网膜水肿程度、空泡样变较 IR 组有所改善和 INL 细胞偶有空泡样变

17图 2（IR6h 组，视网膜 HE 染色， 图 6（IR+NaHS6h 组，视网膜 HE 染×400） 色，×400）视网膜水肿，丛状层疏松增厚，GCL 视网膜水肿程度、空泡样变较 IR 组有所改善和 INL 细胞偶有空泡样变
【学位授予单位】：辽宁医学院
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2012
【分类号】：R774.1

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本文编号：2516361