眼内注射环孢素对早期糖尿病鼠血—视网膜屏障的作用及其机制研究

发布时间：2019-11-03 21:20

【摘要】：目的：探讨玻璃体腔内注射环孢素（Ciclosporin,CsA）对早期糖尿病鼠血-视网膜屏障（Blood-retinal barrier,BRB）的作用并探讨其可能的作用机制。方法：选择8-10周龄的健康雄性SD大鼠，STZ腹腔注射诱导大鼠糖尿病。大鼠分为正常对照组，糖尿病组，糖尿病眼内注射CsA组，糖尿病眼内注射二甲基亚砜（DMSO）组，每组12只。造模成功后4周进行眼内注射，注射48h后处死大鼠获取标本。BRB的渗透性通过免疫组化检测外渗的内源性白蛋白来测定，细胞间粘附分子Ⅰ（intercellul aradhesion molecule-1，ICAM-1）的表达通过蛋白质印迹（westernBlot，WB）检测,血管内皮生长因子（Vascular EndothelialGrowth Factor，VEGF）的表达通过酶联免疫吸附试验（ELISA）的方法进行检测。结果：与正常组相比，糖尿病组视网膜各层外渗的内源性白蛋白增多，视网膜内ICAM-1与VEGF表达显著升高（P0.05），与糖尿病组相比，眼内注射CsA后，糖尿病鼠视网膜外渗的内源性白蛋白减少，视网膜内ICAM-Ⅰ和VEGF表达显著下降（P0.05），，眼内注射DMSO组与糖尿病组相比各项指标均无统计学差异（P0.05）。结论：环孢素可能通过降低ICAM-1以及VEGF的表达对早期糖尿病鼠BRB的破坏起保护作用。
【图文】：

核层,外渗,白蛋白,免疫组织化学染色

实验结果分析1. 免疫组化检测白蛋白的渗漏在荧光显微镜下观察，白蛋白阳性反应呈棕黄色。在正常大鼠视网膜的纤维层、内核层、外丛状层、外核层几乎看不到外渗的白蛋白（图 1A ） ; 糖尿视网膜外渗的白蛋白明显增多，渗漏主要在神经纤维层、内核层、外丛状层核层（图 1 B） ; 眼内注射 C s A 组视网膜各层白蛋白的渗漏减少（图 1C ）；眼内 DM S O 组与糖尿病组视网膜各层白蛋白渗出几乎相同（图 1 D ）。与正常组相糖尿病组视网膜外渗的白蛋白增多（ F= 2 9. 3 5, P 㩳 0. 00 1 ）；与糖尿病组相比，注射组外渗减少（ P 㩳 0. 0 0 1 ）。 DM S O 注射组与糖尿病组之间无统计学（P 0 . 05 ），各组 A 值比较见（图 2）。

网膜,蛋白,视网膜

图 2 视网膜白蛋白 A 值比较 . Th e va lu e o f r e ti n a l a lb u mi n c o mp a ri s o n .*P ＜0 . 0 5， ** P ＜ 0 . 0 1， ** * P ＜ 0 . 00 1 .2 . WB 检测视网膜I CA M - 1的表达2 .1 蛋白定量结果
【学位授予单位】：重庆医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2012
【分类号】：R774.1;R587.1

【参考文献】