老年人群中OSAHS与NAFLD的关系及机制的初步探讨

发布时间：2020-04-26 22:19

【摘要】：目的阻塞性睡眠呼吸暂停(OSAHS)与非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)有着密切的关系,但目前尚缺少关于老年人群中两者关系的研究,同时,OSAHS特征性的慢性间歇低氧造成肝损伤的机制尚未明确,内质网应激在其中可能起到了一定的作用,此研究的目的在于:在临床方面,探讨老年人群中OSAHS与NAFLD的关系,并且通过细胞实验探讨内质网应激在间歇低氧导致肝损伤中的作用及可能的作用机制。方法临床研究中,根据纳入和排除条件,我们在2017年1月至2018年12月期间连续招募65岁以上的怀疑存在睡眠呼吸紊乱并且接受了多导睡眠图的患者,按呼吸暂停低通气指数(AHI)对患者进行分组,分析老年NAFLD患者中合并不同严重程度OSAHS综合征患者之间的差异;按是否存在NAFLD对患者进行分组,分析老年OSAHS患者中非NAFLD与NAFLD患者之间的差异以,并通过logistic回归分析评估老年OSAHS患者中NAFLD发生的可能的危险因素。基础研究中,L02细胞(正常人肝细胞)在常氧条件下或在间歇低氧的条件下培养4、8和12小时,部分间歇低氧处理的L02细胞在暴露于低氧前1小时应用4-PBA处理,观察4-PBA对间歇低氧导致的肝损伤、肝细胞凋亡、内质网应激和PERK-eIFa2-ATF4-CHOP凋亡途径的影响。结果临床研究结果显示,老年NAFLD患者根据OSAHS严重程度(AHI)分组后,各组之间的肝酶(ALT、AST、GGT)水平并没有显著的差异;而根据老年OSAHS患者是否存在NAFLD分组后发现,各组间的体重指数(BMI)、糖化血红蛋白(HbA1c)、血甘油三酯(TG)、肝酶(ALT、AST、GGT)水平、血氧饱和度低于90%的时间(TS90%)、氧减指数(ODI)和AHI存在着显著的差异;其中,BMI、TS90%和ODI这三项指标可能是老年OSAHS患者发生NAFLD的危险因素。基础研究结果显示,1.间歇低氧可以引起肝细胞凋亡;2.间歇低氧可以引起肝细胞发生内质网应激(ERS);3.间歇低氧可以引起肝损伤;4.4-PBA可以减轻间歇低氧诱导的肝细胞损伤;5.4-PBA可以通过抑制细胞凋亡减轻间歇低氧诱导的肝脏细胞损伤;6.4-PBA可以抑制ERS相关凋亡通路(PERK-eIF2a-ATF4-CHOP),但并不抑制间歇低氧诱导的未折叠蛋白反应(UPR)。结论1.老年NAFLD患者中,OSAHS特征性慢性间歇低氧可能不会导致肝酶的显著升高;2.老年OSAHS患者中,BMI、TS90%和ODI可能是促进NAFLD发生和发展的危险因素,因此,控制体重和改善睡眠中的低氧血症对于降低或预防老年OSAHS患者NAFLD的发生发展至关重要,另外,BMI、TS90%和ODI这三项指标也可能可以作为老年OSAHS患者是否存在NAFLD的预测指标;3.4-PBA是通过抑制ERS介导的细胞凋亡来减轻间歇低氧诱导肝细胞损伤的,而不是通过减少UPR来保护肝细胞的。
【图文】：

2.1.1.4 L02 细胞的分组L02 细胞在含 10%(V/V)胎牛血清、100 单位/ml 青链霉素的 RPMI 1640 培养基中，37℃在 5% CO2条件下培养，每 3-5 天传代。之后细胞被随机分为常氧组、间歇低氧组以及间歇低氧+4-PBA 组：实验前，常氧组的细胞在常氧条件下（NC组，21%O2）培养 12h；间歇低氧组（IH 组）在间歇低氧的条件下（使用定制设计的计算机控制的培养箱进行 IH 暴露，，1.5%O210 分钟，随后 21%O25 分钟，反复循环）培养 4、8 或 12 小时；间歇低氧+4-PBA 组（IH+4PBA 组）的 L02细胞在低氧处理前 1 小时将内质网应激的抑制剂 4-苯基丁酸（4-phenylbutyricacid，4-PBA）加入到培养基中（10mm）。2.1.2 间歇低氧的实验方法2.1.2.1 实验仪器和实验耗材电脑程控装置、低氧舱、压缩氧气瓶、压缩空气瓶、氧气表、氧浓度检测仪、温控板（图 1）

天津医科大学博士学位论文歇低氧暴露时间的延长而有所变化，我们将常氧条件下培养了 12 小时的 L02 细胞作为对照组（NC 组，negative control），将间歇低氧处理的 L02 细胞分为四个组，分别进行不同时间的间歇低氧暴露（4、8 和 12 小时），分别为 4h、8h和 12h 组。用免疫蛋白印迹法检测了活化的 caspase-3 和活化的 caspase-12 的表达水平。如图 2A 和 B 所示，L02 细胞在间歇低氧处理 4、8 和 12 小时后，活化的 caspase-3 和活化的 caspase-12 的表达水平显著升高（P＜0.05），并且其中 12h组活化的 caspase-3 和活化的 caspase-12 的表达水平显著高于 4h 和 8h 组（P＜0.05）。 这一结果表明，间歇低氧可以引起肝细胞凋亡，并且会随着间歇低氧暴露时间的延长而加重。
【学位授予单位】：天津医科大学
【学位级别】：博士
【学位授予年份】：2019
【分类号】：R766;R575

【相似文献】

相关期刊论文 前10条

1 邱烈峰;林文_";翁锡全;;间歇低氧运动对肥胖大鼠体成分的影响[J];山东体育学院学报;2008年07期

2 李庆云;李敏;冯耘;郭倩;顾淑一;万欢英;;新型动物慢性间歇低氧箱的制作和应用[J];上海交通大学学报(医学版);2008年09期

3 袁志明;陈宝元;;睡眠呼吸暂停低通气或间歇低氧与高血压[J];中华结核和呼吸杂志;2007年12期

4 陈瑜文;林文_";邱烈峰;翁锡全;;间歇低氧运动对肥胖大鼠食欲的影响及其机制分析[J];体育学刊;2011年04期

5 王琳;徐晏;张伟三;张蔷;;慢性间歇低氧大鼠模型中血管内皮生长因子对脑血管的影响[J];中国老年保健医学;2009年02期

6 吴晓丹;黄建浩;孔德红;邵川;周敬;鲁沈源;李善群;;慢性间歇低氧大鼠模型的建立和超声心动图评价[J];复旦学报(医学版);2011年06期

7 王红阳;张盼盼;陈宝元;雷军旗;刘信荣;;不同程度慢性间歇低氧对大鼠神经细胞凋亡的影响[J];山东医药;2010年52期

8 索涛;陈国忠;;慢性间歇低氧所致高血压的中枢调控机制研究进展[J];海南医学;2016年10期

9 颜素岚;杨宇;张新民;陈宁;;慢性间歇低氧大鼠模型中血管内皮生长因子对心、肺、肾血管的影响[J];疑难病杂志;2006年01期

10 林慧;陈一和;夏晓东;;不同间歇低氧频率对大鼠血压以及血管内皮功能的影响[J];中国现代医生;2017年29期

相关会议论文 前10条

1 赵海燕;陈宝元;曹洁;冯靖;;间歇低氧对人脐静脉内皮细胞中血管内皮生长因子的影响[A];2008年中国睡眠研究会第五届学术年会论文摘要汇编[C];2008年

2 张希龙;;有效干预慢性间歇低氧策略探讨及未来展望[A];呼吸与危重症医学（2010-2011）[C];2011年

3 何权瀛;;慢性间歇低氧的定义和特点[A];中华医学会呼吸病学年会——2011（第十二次全国呼吸病学学术会议）论文汇编[C];2011年

4 刘旭东;;间歇低氧训练对男性大学生心脏功能的影响[A];2013年中国生理学会运动生理学专业委员会年会暨“运动与健康”学术研讨会论文摘要汇编[C];2013年

5 黄丽英;林文_";翁锡全;;间歇低氧训练对大鼠活性氧及抗氧化酶的影响[A];第4届全国青年体育科学学术会议论文摘要汇编[C];2005年

6 赵海燕;陈宝元;冯靖;;间歇低氧对人脐静脉内皮细胞中血管内皮生长因子的影响[A];中华医学会第七次全国呼吸病学术会议暨学习班论文汇编[C];2006年

7 李光;康健;;间歇低氧小鼠胰腺β细胞凋亡及其机制的实验研究[A];中华医学会呼吸病学年会——2011（第十二次全国呼吸病学学术会议）论文汇编[C];2011年

8 翁锡全;林文韬;余群;陈福刁;徐国琴;黄丽英;;间歇低氧暴露防治运动性血红蛋白低下的研究[A];第八届全国体育科学大会论文摘要汇编（一）[C];2007年

9 呙恒娟;陈宝元;李津娜;杨晓燕;姜君男;;抗氧化剂干预间歇低氧对中性粒细胞凋亡影响的研究[A];中华医学会呼吸病学年会——2013第十四次全国呼吸病学学术会议论文汇编[C];2013年

10 黄丽英;林文_";翁锡全;;间歇低氧训练活性氧介导基因调控作用的研究[A];中华人民共和国第十届运动会科学大会论文摘要汇编[C];2005年

相关重要报纸文章 前1条

1 天津医科大学总医院呼吸科教授 陈宝元邋刘道安 整理;间歇低氧危害更大[N];健康报;2007年

相关博士学位论文 前10条

1 刘欣;老年人群中OSAHS与NAFLD的关系及机制的初步探讨[D];天津医科大学;2019年

2 宋淑玲;内质网应激介导的自噬在间歇低氧致胰岛β细胞凋亡中的作用机制研究[D];天津医科大学;2019年

3 于复超;1-磷酸鞘氨醇微泡改善慢性间歇低氧致内皮细胞损伤的机制研究[D];东南大学;2018年

4 康晶;慢性间歇低氧与慢性持续低氧对血管内皮功能及心肌收缩功能影响的比较[D];武汉大学;2018年

5 彭英兰;大蒜素对慢性间歇低氧糖尿病小鼠氧化应激的影响以及对器官功能的保护[D];武汉大学;2018年

6 赵海燕;阻塞性睡眠呼吸暂停模式间歇低氧导致内皮功能障碍的细胞学研究[D];天津医科大学;2007年

7 吴悦陶;间歇低氧状态动脉粥样硬化发生的基因表达谱研究[D];中南大学;2007年

8 冯靖;OSAHS的炎性损伤及与高血压和动脉粥样硬化关系的基础研究[D];天津医科大学;2008年

9 周伟;睡眠呼吸暂停模式间歇低氧大鼠氧化应激机制的研究[D];天津医科大学;2012年

10 王轶娜;慢性间歇低氧通过TNF-α调控fractalkine在OSAHS所致肝损伤中的作用[D];中南大学;2012年

相关硕士学位论文 前10条

1 王聪;基于形态学方法研究间歇低氧对大鼠多脏器损伤及自噬的影响[D];天津医科大学;2018年

2 王艳菊;间歇低氧对于哮喘大鼠瘦素及其受体的影响[D];河北医科大学;2017年

3 李婷婷;慢性间歇低氧对小鼠海马CA1区神经元高电压激活钙电流的作用探讨[D];苏州大学;2017年

4 肖玲;内源性大麻素受体_1在慢性间歇低氧大鼠模型肝脏表达及药物干预的研究[D];山西医科大学;2014年

5 白洋;TLR-4参与睡眠呼吸暂停低通气综合征导致的慢性间歇低氧的实验研究[D];山西医科大学;2016年

6 邵川;慢性间歇低氧及再氧合对肾脏损害的机制研究[D];复旦大学;2011年

7 张晋源;慢性间歇低氧所致大鼠心肌肥厚作用机制的探讨[D];山西医科大学;2014年

8 刘辉玉;慢性间歇低氧对小鼠海马CA1区神经元自噬的影响[D];苏州大学;2011年

9 栗瑞雪;间歇低氧大鼠骨骼肌细胞PTP1B及PI3K表达在胰岛素抵抗中的作用[D];山西医科大学;2016年

10 孟晓菲;基于不同研究方法探讨间歇低氧条件下自噬加重海马神经细胞损伤的机制[D];天津医科大学;2017年

本文编号：2641952