MCM7在人下咽癌细胞系FaDu中的表达及作用研究

发布时间：2020-04-27 09:59

【摘要】：目的:研究MCM7在下咽癌中的表达及作用,为下咽癌的发病机制研究和治疗提供新靶点。方法:(1)利用Real-time PCR检测MCM7在人下咽癌细胞系FaDu中的表达。(2)利用siRNA沉默FaDu细胞中MCM7的表达。分组:siRNA-MCM7处理的FaDu细胞作为实验组(siRNA-MCM7实验组);阴性对照siRNA(siRNA-NC)处理的FaDu细胞作为对照组(siRNA-NC对照组)。利用Real-time PCR和Western blot检测沉默效果。(3)分别利用MTT实验和细胞划痕实验检测MCM7沉默对FaDu细胞增殖和迁移能力的影响。(4)基于TCGA数据库和生物信息学方法建立人头颈部鳞癌中MCM7的共表达基因网络。利用基因模块化分析技术筛选共表达网络中发挥重要作用的核心基因模块,以探索MCM7影响FaDu细胞增殖及迁移的潜在机制。结果:(1)人下咽癌细胞系FaDu中表达MCM7基因。(2)沉默效果验证的结果显示siRNA-MCM7处理的FaDu细胞中MCM7的表达受到明显抑制。(3)MTT实验证实,与对照组相比,MCM7沉默的FaDu细胞的增殖能力受到明显抑制(P0.05)划痕实验结果显示MCM7沉默后,FaDu的细胞迁移能力显著下降(P0.05)。(4)人头颈部鳞癌中MCM7的共表达基因网络揭示MCM7可能通过影响其共表达基因发挥DNA复制、DNA损伤修复、调节细胞周期和细胞增殖等功能(P0.05)。基因模块化分析显示MCM7可能通过调控一个包含MCM6、RFC2、RFC5、CDC6等18个基因的基因模块影响FaDu细胞的增殖和迁移。结论:(1)人下咽癌细胞系FaDu中表达MCM7。(2)MCM7沉默能够抑制FaDu细胞的增殖及迁移能力。(3)MCM7可能通过调控其共表达基因模块发挥调节DNA复制、调节细胞增殖及周期等功能。
【图文】：

基因,对照组

图 2-1 FaDu 细胞表达 MCM7 基因Figure 2-1 The expression of MCM7 in FaDu7 的沉默检测lot 和 Real-time PCR 检测 MCM7 的 siRNA-NC 对照组相比（1.12±0.09）显著降低（0.53±0.13），P=0.003，如示与 siRNA-NC 对照组相比（1.13±0表达显著降低（0.52±0.18），二者差 2-2 B 所示。提示 FaDu 细胞中的 M

效果检测

图 2-2 FaDu 中，MCM7 的沉默效果检测（A. MCM7 在蛋白水平的沉默效果；B.MCM7 在 mRNA 水平的沉默效果）Figure 2-2 The silent effect of MCM7 in FaDu（A. The silent effect of MCM7 in protein level; B. The silent effect of MCM7 in mRNAlevel）2.3 MCM7 对 FaDu 细胞增殖能力的影响为了检测 MCM7 对 FaDu 细胞增殖能力的影响，我们利用 MTT 实验检测了 siRNA-NC 对照组和 siRNA-MCM7 组 FaDu 细胞在 0h、24h、48h 和72h 的细胞增殖能力。结果显示与 siRNA-NC 对照组相比，siRNA-MCM组 FaDu 细胞在 0h 和 24h 的细胞增殖量无显著差异，P<0.05。但是，在 48时，siRNA-MCM7 组的细胞增殖与 siRNA-NC 对照组相比，，受到明显抑制P<0.01。在 72h，这种差异更加明显，P<0.001。这一结果提示 MCM7 基因
【学位授予单位】：桂林医学院
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2019
【分类号】：R739.63

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