18β-甘草次酸钠对变应性鼻炎大鼠鼻黏膜TSLP的干预研究

发布时间：2020-05-04 06:46

【摘要】：目的:使用18β-甘草次酸钠对变应性鼻炎大鼠滴鼻,观察对大鼠鼻黏膜TSLP表达的影响,探索18β-甘草次酸钠对变应性鼻炎的作用机制。方法:100只Wistar大鼠随机分为5组,分别是正常对照组,AR模型组,布地奈德组,18β-甘草次酸钠20mg/kg和40mg/kg剂量组。除正常对照组外,其余4组以卵清蛋白致敏建立AR动物模型,造模成功后,以分组给予药物干预,用药周期为2周和4周。使用ELISA测定并比较各组间大鼠血清中IL-4和OVA-sIgE的浓度水平;免疫组化法检测TSLP在大鼠鼻黏膜的分布情况,免疫印迹在蛋白水平检测并比较各组间大鼠鼻黏膜TSLP的表达;实时荧光定量PCR在转录水平检测并比较各组间大鼠鼻黏膜TSLP-mRNA的表达。结果:免疫组化和免疫印迹证实大鼠鼻黏膜中TSLP表达于上皮细胞、内皮细胞和上皮纤毛处。AR模型组较正常对照组大鼠鼻黏膜TSLP及TSLP-mRNA的表达明显增强(P0.05),给予药物干预2周、4周后,布地奈德组,18β-甘草次酸钠20mg/kg和40mg/kg剂量组均出现大鼠鼻黏膜TSLP及TSLP-mRNA的表达被抑制,较AR模型组均有明显统计学差异(P0.05),和正常对照组相比不存在统计差异(P0.05)。随着TSLP受抑制,IL-4、OVA-sIgE的血清浓度也降低。结论:18β-甘草次酸钠对变应性鼻炎大鼠鼻黏膜TSLP有明显抑制作用,可以控制Th2型免疫炎症反应,表明18β-甘草次酸钠在变应性鼻炎治疗中具有潜在的应用价值。
【图文】：

对比图,滴鼻液,PH值,对比图

加盐酸前 PH 试纸颜色，与比色卡比对约在 8～9 之间；b 为滴加盐酸后 PH与比色卡比对约在 7～8 之间。图 2-1 配制 18β-甘草次酸钠滴鼻液的 PH 值对比图精液量取 75%乙醇 99ml 及 1ml 浓 HCl，将其充分混匀，加盖密封备用去离子水 0.5 升，向其中加入 DEPC 原液 0.5mL，充分搅拌，最终液的最终浓度为 0.1%。摇床 37℃震荡 24h，混合均匀后加入无材料中，摇床培育一昼夜，然后收集 DEPC 水，灭菌三分钟。低温注意在未高压前，DEPC 有剧毒，所以操作小心翼翼，，做好防护措糖凝胶

流程图,大鼠,建模,流程图

2.2.2 实验动物的分组及药物干预利用随机数字表法将 100 只 Wistar 大鼠随机分成正常对照组、AR 模型组、布地奈德组和 18β-甘草次酸钠 20mg/kg 和 40mg/kg 剂量组，每组 20 只，还有 6只大鼠用于预实验。除正常对照组，对其余组大鼠进行 AR 造模，模型建立之后，接着依据大鼠给药剂量（mg/kg）=人的给药剂量（mg/m2）/大鼠的体重（kg）×大鼠的体表面积（m2）进行药物干预（22～49 天）。布地奈德组（阳性药物对照组 0.2mg/kg：50ul/侧鼻腔×次，3 次/日）以布地奈德混悬液给大鼠滴鼻；18β-甘草次酸钠 20mg/kg 和 40mg/kg 剂量组（50ul/侧鼻腔×次，3 次/日）以配置好的低、高浓度 18β-甘草次酸钠溶液滴鼻。AR 模型组和正常对照组以等量的生理盐水滴鼻（50ul/侧鼻腔×次，3 次/日）。该阶段除正常对照组，其他各组均以 2%OVA滴鼻（50ul/侧鼻腔，1 次/隔日），维持鼻腔激发，正常对照组以等体积的生理盐水滴鼻。然后在实验第 35 天和第 49 天完成 2 周和 4 周的药物干预，并于两次给药干预末次 24 h 后进行大鼠血清、鼻黏膜取材，每组 10 只大鼠（如图 2-2）。
【学位授予单位】：兰州大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2019
【分类号】：R765.21

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