TGR5在Vogt-小柳原田综合征发病机制中的作用研究

发布时间：2020-05-11 12:53

【摘要】：目的:探讨G蛋白偶联胆汁酸受体-1(G-protein-coupled bile acid receptor-1,TGR5)在Vogt-Koyanagi-Harada综合征(VKH)发病机制中的作用。方法:采用实时荧光定量(Real-time polymerase chain reaction,RT-PCR)检测M1型巨噬细胞中TGR5、iNOS、CD16、Arg1和CD206mRNA水平,运用酶联免疫吸附试验(Enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)检测细胞培养上清液中TNF-α,IL-1β,IL-6和IL-10的蛋白水平及用流式细胞荧光分选技术(Fluorescence activated Cell Sorting,FACS)检测Th1和Th17细胞比例,收集上清液运用ELISA检测相应细胞因子IFN-γ和IL-17的表达水平,然后进行相关的统计学分析。结果:活动期VKH综合征患者M1型巨噬细胞中TGR5受体mRNA水平较健康对照组显著降低。TGR5的特异型激动剂INT-777可以诱导活动期VKH综合征患者的M1型巨噬细胞向M2型巨噬细胞转换,并减少炎症因子TNF-α,IL-1β和IL 6的分泌,促进IL-10的分泌。将M1型巨噬细胞和CD4~+T细胞共培养后,TGR5的激活能够抑制Th1和Th17极化并且降低IFN-γ和IL-17的表达。结论:研究表明,TGR5受体的低表达可能是VKH综合征发病的原因之一。
【图文】：

Real-time PCR 检测 TGR5 的相对 mRNA 水平(活动期 VKH 综合征患康人 n=8， *p<0.05)。采用独立样本 t 检验进行统计分析macrophages from patients and healthy subjects using real-time PCR to m mRNA level of TGR5 (active VKH patients: n=8, healthy subjects: n=8, Using Independent-sample t test for statistical analysis.5 的激活使 M1 向 M2 极化研究 TGR5 对巨噬细胞表型的作用，我们首先通过 Real-time动剂 INT-777 对巨噬细胞中 TGR5 mRNA 表达的影响。我们发现征患者的 M1 型巨噬细胞中，INT-777 刺激后 TGR5 受体的表并且，在活动期 VKH 综合征患者的 M1 型巨噬细胞中加入 IN M1 巨噬细胞表面标志物 iNOS 和 CD16 的表达明显降低，M2物 Arg1 和 CD206 的表达显著升高。证明加入INT-777 后使得活者的 M1 型巨噬细胞向 M2 型巨噬细胞极化。

动期 VKH 综合征患者的 M1 巨噬细胞与 INT-777 共培养 24 小时。用 Real-t组 TGR5 的相对表达(n=8， ***p<0.001)。结果采用 Wilcoxon 配对样本 t 检验异分析。1 macrophages from patients were cultured with or without the TGR5 agonist 4 hours. Relative expression of TGR5 mRNAwas measured using real-time PCR**P< 0.01). Results were analyzed using the Wilcoxon matched pairs test.
【学位授予单位】：重庆医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2019
【分类号】：R773

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本文编号：2658486