单纯疱疹病毒及腺病毒与慢性结膜炎的相关性研究

发布时间：2020-07-10 04:51

【摘要】：慢性结膜炎是眼科的常见病、多发病。慢性结膜炎根据主要致病因素可分为感染性结膜炎（细菌、病毒、衣原体等）和非感染性结膜炎（机械性刺激、药品等化学性刺激、眼部其他疾病、不良卫生环境刺激、不良的生活习惯等）。在临床上由病毒感染导致的慢性结膜炎呈逐渐增多趋势，部分报道由病毒感染导致的慢性结膜炎其重要体征为下睑的滤泡。为探讨慢性结膜炎中单纯疱疹病毒1型（Herpes simplex virus-1，HSV-1）及腺病毒(Adenovirus，ADV)的感染比例及在有下睑滤泡体征的慢性结膜炎患者中两者的感染情况，本实验以临床诊断为慢性结膜炎患者（分为有下睑滤泡体征的慢性结膜炎患者、无下睑滤泡体征的慢性结膜炎两组）及正常人群为研究对象，采集患者眼部泪液标本，应用实时荧光定量PCR (Real-time fluorescence quantification PCR,FQ-PCR)技术检测有下睑滤泡体征的慢性结膜炎患者中单纯疱疹病毒1型及腺病毒的感染比例。 目的:通过实时荧光定量PCR技术检测单纯疱疹病毒（主要是HSV-1）及腺病毒在慢性结膜炎和正常人群中的泪液标本感染比例，及在有下睑滤泡体征的慢性结膜炎、无下睑滤泡为体征的慢性结膜炎患者中的表达情况。 方法:采集临床诊断为慢性结膜炎患者的结膜囊泪液标本102例，正常人群结膜囊泪液标本30例。通过实时荧光定量PCR检测单纯疱疹病病毒1型（单纯疱疹病毒性结膜炎主要由HSV-1引起）及腺病毒在有下睑滤泡体征的慢性结膜炎组、无下睑滤泡的慢性结膜炎组及正常人群组中的表达。分析病毒感染在慢性结膜炎致病因素中所占比例，并将慢性结膜炎患者分为有下睑滤泡体征的慢性结膜炎组(n=59)和无下睑滤泡的慢性结膜炎组(n=43)。应用实时荧光定量PCR技术检测单纯性疱疹病毒1型及腺病毒在两组中的表达情况。分析单纯疱疹病毒-1型与腺病毒在两组中表达的水平差异及与下睑滤泡体征的相关性。所得数据用SPSS l3.0统计软件进行相应统计学分析。 结果:①单纯疱疹病毒1型在慢性结膜炎患者中的阳性表达率为23.53%(24/102),在正常人群组中阳性表达率为3.33%(1/30)；在有下睑滤泡体征的慢性结膜炎中的阳性表达率为32.2%(19/59)；在无下睑滤泡体征的慢性结膜炎中的阳性表达率为11.63%(5/43)；单纯疱疹病毒1型在有下睑滤泡体征的慢性结膜炎组的表达与无下睑滤泡体征的慢性结膜炎组的表达差异具有统计学意义(P0.05)。②腺病毒在慢性结膜炎患者中的阳性表达率为27.45%（28/102）,在正常人群组中阳性表达率为6.67%(2/30)；在有下睑滤泡体征的慢性结膜炎中的阳性表达率为35.6%(21/59)；在无下睑滤泡体征的慢性结膜炎中的阳性表达率为16.28%(7/43)；腺病毒在有下睑滤泡体征的慢性结膜炎组的表达与无下睑滤泡体征的慢性结膜炎组的表达差异具有统计学意义(P0.05)。③单纯疱疹病毒1型及腺病毒在慢性结膜炎患者中的感染比例为50.98%（52/102）。单纯疱疹病毒1型及腺病毒在有下睑滤泡体征的慢性结膜炎患者中的感染比例67.8%（40/59）。 结论：①在慢性结膜炎中由单纯疱疹病毒-1型和腺病毒感染引起的病毒性结膜炎占有较大的比例。 ②慢性结膜炎下睑滤泡的产生与病毒感染（单纯疱疹病毒1型、腺病毒）有关。
【学位授予单位】：吉林大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2012
【分类号】：R777.31
【图文】：

图 3.1 自制的泪液标本采集用纱布片及 EP 管.2 提取标本基因组 DNA按试剂盒说明书程序进行泪液基因组 DNA 提取。基本过程如下(在室温进行腺病毒 DNA 提取：1.阴性质控品处理：取出试剂盒中阴性质控品，离心机 8000rpm 转速下离心 1净化工作台上，微量加样器吸取 50μl 阴性质控品置于 0.5ml 灭菌离心管中，lDNA 提取液充分混匀，100℃恒温处理 10 分钟。12000 rpm 转速下离心 5 分。2.标本处理 ：(1) 将保存泪液样本从低温冰箱中取出后，在室温下融化，向 入 1 ml 无菌生理盐水，至于振荡器上 1 分钟充分震荡摇匀；(2) 置于净化工作台上后用微量加样器取 100μl 液体转至 1.5ml 离心管中，μl 浓缩液混匀，12000rpm 转速下离心 10 分钟；

22图3.2 单纯疱疹病毒-1型典型PCR结果（曲线1、2、3、4为阳性质控品，曲线5、6为测试标本阳性样品，曲线7为阴性质控品，曲线8为测试样本阴性样品）.图3.3 腺病毒典型PCR结果（曲线1、2、3、4为阳性质控品，曲线5为测试标本阳性样品，曲线6为测试样本阴性样品，曲线7为阴性质控品）.

（曲线1、2、3、4为阳性质控品，曲线5、6为测试标本阳性样品，曲线7为阴性质控品，曲线8为测试样本阴性样品）.图3.3 腺病毒典型PCR结果（曲线1、2、3、4为阳性质控品，曲线5为测试标本阳性样品，曲线6为测试样本阴性样品，曲线7为阴性质控品）.

【参考文献】

相关期刊论文 前10条

1 尹安坤;单纯疱疹性角膜炎中医药治疗进展[J];中医药临床杂志;2005年02期

2 姚建婷;晋安;;HSV及其实验室检测研究进展(综述)[J];安徽卫生职业技术学院学报;2010年01期

3 朱则今,吴静安,陶佩珍,王淑琴;广谱抗病毒药17997治疗实验性单纯疱疹性角膜炎的疗效观察[J];北京医科大学学报;1998年06期

4 郭杨;陈世界;郭万柱;李t

本文编号：2748471