慢性间歇低氧对大鼠肾脏组织线粒体动力学调控蛋白Fis1、Mfn1表达的影响及临床意义

发布时间：2020-07-10 13:53

【摘要】：目的:本文采用CIH的大鼠模型模拟OSAHS,通过测定线粒体动力学调控蛋白Fis1、Mfn1在大鼠肾脏组织的表达,来探讨CIH对其线粒体动力学的影响及临床意义,同时进一步研究内源性大麻素系统(EC_S)是否通过影响线粒体动力学进而导致肾脏损伤。方法:选取40只健康成年雄性SD大鼠,建立CIH模型模拟OSAHS,并随机分为5组,正常对照组,CIH4周组,CIH6周组,CIH+药物干预4周组,CIH+药物干预6周组,其中干预组每日在造模前腹腔注射利莫那班(CB_(1R)拮抗剂)1.5mg/kg/d,其余组予等量生理盐水。在实验第4周、第6周时分别全部处死,分离出每只大鼠的肾脏组织,进行石蜡包埋。HE染色后在光学显微镜下观察肾脏组织的病理改变,使用免疫组化法检测大鼠肾脏组织中Fis1和Mfn1的表达情况。采用SPSS 25.0统计学软件处理数据,采用完全随机设计单因素方差分析,组间采取LSD-t检验进行均数间的多重比较,用均数±标准差(~_x±s)表示计数资料。结果:1、HE染色病理学改变:对照组大鼠肾小球、肾小管上皮细胞形态规则,未见明显异常;CIH4周组大鼠肾小管上皮细胞中度肿胀,胞浆较为稀疏,管腔较狭窄,肾小球未见明显异常;CIH6周组肾小管上皮细胞排列紊乱,胞浆特别稀疏,高度肿胀变性,管腔狭窄以至消失,肾小球轻度肿胀,球囊间隙轻度狭窄;CIH+药物干预4周组的肾小管上皮细胞较单纯CIH4周组相比,排列更为整齐,肿胀程度较轻;CIH+药物干预6周组的肾小管上皮细胞较单纯CIH6周组相比,肿胀程度也较轻,肾小球肿胀程度减轻,球囊间隙稍增宽。2、与对照组比较,单纯CIH组大鼠肾小管上皮细胞Fis1蛋白的表达显著上调,而Mfn1蛋白的表达显著下调,差异均有统计学意义(P0.05),其中以CIH6周组变化最明显,Fis1与CIH时间呈正相关,而Mfn1与CIH时间呈负相关。3、与单纯CIH组相比,药物干预组大鼠肾小管上皮细胞Fis1蛋白的表达下调,而Mfn1蛋白的表达上调,差异有统计学意义(P0.05)。结论:1、证实了CIH可诱导线粒体动力学的变化,且随着CIH时间的延长,线粒体裂变增加;2、CB_(1R)拮抗剂干预可抑制CIH引起的线粒体动力学紊乱,从而减轻CIH诱导的大鼠肾脏组织损伤。
【学位授予单位】：山西医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2019
【分类号】：R766;R692
【图文】：

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在实验第 4 周、第 6 周时，留取肾脏标本。间歇低氧舱动物解剖示意图1.2 实验方法1.2.1 主要仪器（1）石蜡包埋机（德国 Leica 牌 EG1140H）

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山西医科大学硕士学位论文10图2-1 肾脏组织HE染色病理改变2.2 Fis1/Mfn1 蛋白在大鼠肾脏组织的免疫组化表达2.2.1 Fis1 蛋白在大鼠肾脏组织中的表达情况免疫组化显示 Fis1 在各组大鼠肾小球和肾小管中均有表达，在光学显微镜下可见胞浆呈浅黄色或棕色。对照组可见肾小球和肾小管中只有少量表达；CIH 组 Fis1蛋白在肾小管中表达明显增加，其中 CIH6 周组表达结果最高，与正常对照组相比，差异有统计学意义（P＜0.05，见表 1-1）；与 CIH4 周组比较，CIH+药物干预 4 周组 Fis1 蛋白表达结果显著降低，差异有统计学意义（P＜0.05，见表 1-2）；与 CIH6周组比较

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11图 2-2 各组 Fis1 蛋白在大鼠肾脏组织中的免疫组化表达情况2.2.2 Mfn1 蛋白在大鼠肾脏组织中的免疫组化表达情况免疫组化显示 Mfn1 在各组大鼠肾小球和肾小管中均有表达，在光学显微镜下可见胞浆呈浅黄色或棕色。对照组可见肾小球和肾小管中有大量表达；CIH 组 Mfn1蛋白在肾小管中表达明显降低，其中 CIH6 周组表达结果最低，与正常对照组相比，差异有统计学意义（P＜0.05，见表 1-1）；与 CIH4 周组比较，CIH+药物干预 4 周组 Mfn1 蛋白表达结果显著增加，差异有统计学意义（P＜0.05，见表 1-2）；与 CIH6周组比较，CIH+药物干预 6 周组 Mfn1 蛋白表达结果显著增加，差异有统计学意义（P＜0.05，见表 1-3，图 2-3）。

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