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甘露糖结合凝集素与Dectin-1、TLR2在真菌性角膜炎中的相互作用

发布时间:2020-07-24 10:00
【摘要】:目的:探讨甘露糖结合凝集素(mannose binding lectin,MBL)在烟曲霉菌感染的人角膜上皮细胞中的作用,及其与Dectin-1、TLR2的相互作用。方法:以体外培养的正常人永生化角膜上皮细胞为对照组,实验组为烟曲霉菌菌丝抗原、重组人MBL(recombination human MBL,rh MBL)、MBL抗体、昆布多糖及TLR2抗体刺激的人永生化角膜上皮细胞,在4,8,12h时间点用Western blot法检测MBL蛋白表达,在0.5,1,2,4h用real-time PCR法检测MBL m RNA,在8h时间点real-time PCR法检测Dectin-1、TLR2、IL-1β及TNF-αm RNA,在24h时间点用Western blot法检测Dectin-1、TLR2蛋白表达,在24h时间点用Elisa法检测IL-1β、TNF-α蛋白表达变化。结果:烟曲霉菌菌丝抗原刺激后可引起MBL基因及蛋白水平表达量相对增高,基因水平表达呈时间依赖性,1h时达到峰值。rh MBL可促进下游细胞因子IL-1β、TNF-α的基因及蛋白水平表达,并呈剂量依赖性,10ug/ml rh MBL增强作用最强,抑制MBL可减少IL-1β、TNF-α的基因及蛋白水平表达。rh MBL能增强烟曲霉菌菌丝刺激引起的Dectin-1、TLR2的产生,呈剂量依赖,10ug/ml为最佳刺激浓度,抑制MBL能明显下调Dectin-1、TLR2表达。分别以昆布多糖及TLR2抗体抑制Dectin-1、TLR2,MBL表达均较单纯真菌刺激组降低。其表达变化差异均有统计学意义。结论:MBL存在于正常角膜上皮细胞中,烟曲霉菌菌丝刺激引起其表达升高。MBL参与了人角膜上皮细胞对烟曲霉菌菌丝抗原的识别,介导下游炎症因子释放,在人角膜上皮细胞固有免疫早期阶段发挥作用。MBL可增强真菌性角膜炎中模式识别受体Dectin-1、TLR2的表达,间接促进机体抗感染作用;MBL与Dectin-1、TLR2在人角膜上皮细胞抗真菌感染中发挥协同作用,介导角膜上皮炎症反应。
【学位授予单位】:青岛大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2015
【分类号】:R772.21

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本文编号:2768678

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