载吲哚菁绿与阿霉素靶向纳米粒用于视网膜母细胞瘤体外成像的实验研究

发布时间：2020-07-29 13:52

【摘要】：目的:1.制备一种靶向叶酸受体的载吲哚菁绿(ICG)及阿霉素(ADM)的相变型多功能脂质纳米粒(ICG/FA/Pct-PFPNP:ADM),并研究该纳米粒的基本性质,检测其光热效应、光声及超声双模态显像能力。2.探讨ICG/FA/Pct-PFPNP:ADM纳米粒生物安全性,及其在体外环境下对视网膜母细胞瘤细胞的寻靶作用,为进一步实现视网膜母细胞瘤体内靶向双模态成像提供前期研究基础。方法:1.采用薄膜水化-双步乳化法,利用叶酸修饰的脂质外壳装载ICG、PFP与ADM,制备ICG/FA/Pct-PFPNP:ADM纳米粒。通过Malvern粒径仪分析纳米粒的粒径、表面电位。通过紫外分光光度计检测ICG及ADM的包封率及载药量。通过激光共聚焦显微镜观察ICG/FA/Pct-PFPNP:ADM纳米粒表面叶酸表达情况并通过流式细胞仪检测其表达率。2.808nm激光辐照条件下利用红外成像仪检测ICG/FA/Pct-PFPNP:ADM纳米粒光热效应并通过光学显微镜观察其光致相变过程。3.通过CCK-8法检测ICG/FA/Pct-PFPNP纳米粒的生物安全性,并通过激光共聚焦显微镜及流式细胞术检测ICG/FA/Pct-PFPNP:ADM组(靶向组)、ICG/Pct-PFPNP:ADM组(非靶向组)及抗体封闭组对视网膜母细胞瘤Y79细胞的体外寻靶能力。4.利用光声成像仪检测不同浓度的ICG/FA/Pct-PFPNP:ADM纳米粒光声效果并检测其光声信号值,分析光声信号的强弱和浓度之间的关系。给予808nm激光辐照,观察不同浓度的ICG/FA/Pct-PFPNP:ADM纳米粒体外增强超声显影作用并通过DFY软件分析激光致相变前后超声强度的变化情况。结果:1.本研究成功制备了ICG/FA/Pct-PFPNP:ADM纳米粒,平均粒径为374.4±23.48 nm,平均表面电位-28±4.5 mV。光镜及电镜下观察到ICG/FA/Pct-PFPNP:ADM外观呈球形且分布均匀。ICG包封率为(91.85±2.98)%,载药量为(9.19±0.29)%;ADM包封率为(62.04±5.1)%,载药量为(6.2±0.51)%。流式细胞术和激光共聚焦显微镜结果均显示纳米粒表面叶酸表达情况良好,表达率为(98.83±0.17)%。2.ICG/FA/Pct-PFPNP:ADM纳米粒具有良好的光热转换能力,且光热效能与纳米粒浓度及激光功率呈正相关关系。并且在给予激光辐照后,纳米粒能迅速相变成为微泡。3.CCK-8法测得ICG/FA/Pct-PFPNP纳米粒具有良好的生物安全性。共聚焦显微镜下观察,Y79细胞由于表面高表达叶酸受体,在受体-配体作用下能与大量ICG/FA/Pct-PFPNP:ADM纳米粒结合,而非靶向组和抗体封闭组Y79细胞周围纳米粒明显较少。流式细胞仪测得靶向组与Y79细胞连接率为(96.57±3.17)%,与非靶向组、抗体封闭组相比差异具有统计学意义(F=1537.6,P0.05)。4.ICG/FA/Pct-PFPNP:ADM纳米粒具有显著的光声成像能力,且光声信号随纳米粒浓度升高而增强。在经过808 nm近红外激光辐照后,ICG/FA/Pct-PFPNP:ADM纳米粒溶液在超声成像系统中的B-mode和Contrast-enhanced ultrasound(CEUS)两个模式下超声信号均有所增强。结论:1.本研究通过薄膜水化-双步乳化法成功制备了载吲哚菁绿与阿霉素的靶向相变型纳米粒(ICG/FA/Pct-PFPNP:ADM),该纳米粒形态规则、粒径分布均匀、载药量较高、靶向性能好、生物安全性高。808nm激光辐照条件下可致其相变并产生光热效应。2.制备的ICG/FA/Pct-PFPNP:ADM纳米粒具有良好的光声/超声双模态显像能力,结合其良好的靶向能力,为实现视网膜母细胞瘤的双模态显影提供了一种新的可能。
【学位授予单位】：重庆医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2019
【分类号】：R739.7
【图文】：

图 1-1 ICG/FA/Pct-PFPNP：ADM 纳米粒乳液Fig. 1-1 The emulsion ofICG/FA/Pct-PFPNP：ADM图 1-2 ICG/FA/Pct-PFPNP：ADM 纳米粒透镜图Fig. 1-2 TEM image of ICG/FA/Pct-PFPNADM图 1-3 ICG/FA/Pct-PFPNP：ADM 纳米粒粒径分布图Fig. 1-3 Size distribution ofICG/FA/Pct-PFPNP：ADM图 1-4 ICG/FA/Pct-PFPNP：ADM 纳米粒表位分布图Fig. 1-4 Zeta potential of ICG/FA/Pct-PFPNADM

图 1-1 ICG/FA/Pct-PFPNP：ADM 纳米粒乳液Fig. 1-1 The emulsion ofICG/FA/Pct-PFPNP：ADM图 1-2 ICG/FA/Pct-PFPNP：ADM 纳米粒透镜图Fig. 1-2 TEM image of ICG/FA/Pct-PFPNADM图 1-3 ICG/FA/Pct-PFPNP：ADM 纳米粒粒径分布图Fig. 1-3 Size distribution ofICG/FA/Pct-PFPNP：ADM图 1-4 ICG/FA/Pct-PFPNP：ADM 纳米粒表位分布图Fig. 1-4 Zeta potential of ICG/FA/Pct-PFPNADM

附图图 1-1 ICG/FA/Pct-PFPNP：ADM 纳米粒乳液Fig. 1-1 The emulsion ofICG/FA/Pct-PFPNP：ADM图 1-2 ICG/FA/Pct-PFPNP：ADM 纳米粒透射电镜图Fig. 1-2 TEM image of ICG/FA/Pct-PFPNP：ADM

【相似文献】

相关期刊论文 前10条

1 宋小杰;廖瀚;王冰;王艳妨;张英;;赖氨酸超小纳米粒的制备及胶质瘤细胞荧光成像[J];功能材料;2017年01期

2 邢畅;;二氧化硅纳米粒消化酶蛋白冠的形成及影响因素[J];现代化工;2017年04期

3 尤晨;李琳;杨文倩;沈雁;涂家生;;银模板法制备中空金纳米粒及其质量评价[J];药学研究;2017年04期

4 赵娜;崔慧斐;;肝素纳米粒的研究进展[J];中国药学杂志;2013年18期

5 陈军;纳米粒技术在转运药物通过血脑屏障中的应用[J];国外医学.药学分册;2002年06期

6 陈中坚;陆琴;方超;;碗状纳米粒的制备、表征及载药功能的评价[J];上海交通大学学报(医学版);2018年05期

7 严拯宇;舒娟;余雁;张正伟;唐璐;陈建秋;;碳纳米粒的制备及其用于氯霉素的测定[J];中国药科大学学报;2015年03期

8 梁娟娟;耿冬冬;丁娅;张灿;;金纳米粒在药物传递系统中的应用[J];药学进展;2014年04期

9 赵国巍;陈绪龙;廖正根;梁新丽;祝婧云;招丽君;王春柳;;三七皂苷长循环纳米粒的性质研究[J];中成药;2011年10期

10 黄丹华;戚雪勇;戈延茹;沈松;;磁性四氧化三铁纳米粒在磁共振/光热双模式成像中的应用[J];药学学报;2017年03期

相关会议论文 前10条

1 邱崇;魏巍;孙晶;王坚成;;靶向递送siRNA的核壳型磷酸钙纳米粒的研究[A];中国药学会第十三届青年药学科研成果交流会论文集[C];2016年

2 王玉鹏;周东方;黄宇彬;;新型蛋白纳米粒药物载体制备方法的研究[A];中国化学会2017全国高分子学术论文报告会摘要集——主题F：生物医用高分子[C];2017年

3 诸佳珍;李范珠;;阿霉素自组装纳米粒的制备及其抗肿瘤活性的研究[A];第十一届全国青年药学工作者最新科研成果交流会论文集[C];2012年

4 冯强;于敏之;侯文杰;王坚成;张强;;伐普肽修饰的核壳型纳米粒用于紫杉醇/siRNA的共递送研究[A];第十二届全国青年药学工作者最新科研成果交流会论文集[C];2014年

5 刘玉梅;欧阳五庆;马淑燕;杨宝平;;长春碱纳米粒的制备及其抗肿瘤活性的研究[A];中国畜牧兽医学会兽医药理毒理学分会第十次研讨会论文摘要集[C];2009年

6 蒋锡群;丁丹;刘成杰;王晶;武伟;;蛋白大分子纳米粒的组装、细胞摄取和药物传输[A];2011年全国高分子学术论文报告会论文摘要集[C];2011年

7 谢萌;龚艳容;金一;;载阿霉素介孔二氧化硅纳米粒的制备及体外耐药逆转研究(英文)[A];第十一届全国青年药学工作者最新科研成果交流会论文集[C];2012年

8 黄潇;;眼用氟尿嘧啶纳米粒制剂的制备[A];第六届全国中医中西医结合眼科学术交流会论文汇编[C];2007年

9 康琳;高钟镐;;新型二氯(1,2-环己二胺)铂(Ⅱ)纳米粒的制备及其抗肿瘤研究[A];第一届《药学学报》药学前沿论坛暨2015年中国药学会中药与天然药物专业委员会会议论文摘要集[C];2015年

10 胡豫;;组织因子靶向性蛋白纳米粒的制备及其在抗血栓治疗中的应用[A];第十二次全国临床药理学学术会议会议论文集[C];2010年

相关重要报纸文章 前10条

1 记者 刘霞;纳米粒子可使老鼠看到红外光[N];科技日报;2019年

2 记者 张梦然;医用纳米粒子可为农作物输送营养[N];科技日报;2018年

3 新华;科学家说纳米粒子可能有害健康[N];福建科技报;2007年

4 王小龙;纳米粒子可经水果等食物进入人体[N];科技日报;2013年

5 刘霞;液体中的纳米粒子可用于存储信息[N];科技日报;2014年

6 记者 毛黎;放射性纳米粒子可定向附着杀灭癌细胞[N];科技日报;2013年

7 记者 刘海英;纳米粒子回收再利用有新法[N];科技日报;2010年

8 ;纳米粒子能轻易侵入人脑,护肤品安全待检验[N];新华每日电讯;2008年

9 记者 冯卫东;纳米粒子成就抗癌药物靶向新系统[N];科技日报;2016年

10 张中桥;四医大西京医院发现纳米粒可作 VEG F基因载体[N];中国医药报;2007年

相关博士学位论文 前10条

1 刘二刚;磁靶向银纳米粒载药系统的构建及抗肿瘤研究[D];天津大学;2017年

2 王洋;靶向载药相变型纳米粒用于甲状腺未分化癌超声分子成像与治疗研究[D];吉林大学;2019年

3 张妮;载aPD1靶向相变型纳米粒对恶性黑色素瘤光热治疗及增效免疫治疗的研究[D];重庆医科大学;2019年

4 钟毅欣;靶向纤维蛋白的相变型多模态纳米粒血栓显像及溶栓的基础研究[D];重庆医科大学;2019年

5 李宜蓁;F3肽介导载亚甲蓝及钆双胺纳米粒双模态成像及声动力协同HIFU治疗乳腺癌的实验研究[D];重庆医科大学;2019年

6 王海燕;载UCNPs-RB相变型纳米粒靶向卵巢癌多模态成像与治疗的实验研究[D];重庆医科大学;2019年

7 宋娇;近红外光触发纳米粒用于小鼠乳腺肿瘤多模成像和光热治疗的实验研究[D];重庆医科大学;2019年

8 张勇;载声敏剂液态氟碳纳米粒预定位靶向增强HIFU消融的实验研究[D];重庆医科大学;2018年

9 杨涛;蛋白纳米粒的仿生合成及其在肿瘤诊断与治疗中的应用[D];苏州大学;2018年

10 葛云龙;姜黄素纳米粒的液相沉积法制备工艺、表征与活性评价[D];东北林业大学;2016年

相关硕士学位论文 前10条

1 高璇;低分子明胶修饰的阳离子多功能脂质纳米粒抑制肿瘤生长和转移的研究[D];上海交通大学;2017年

2 王瑞玉;基于湿疹治疗的透皮吸收生物粘附纳米制剂的研制[D];青岛科技大学;2019年

3 孙祥石;叶酸靶向酸敏感siRNA纳米粒在类风湿性关节炎治疗中的研究[D];吉林大学;2019年

4 卢超;MR监测2-DG标记的载PTX氧化铁纳米粒靶向荷三阴性乳腺癌4T-1肿瘤的诊疗效果研究[D];江苏大学;2019年

5 赵雅蓉;转铁蛋白修饰的还原响应型脂质纳米粒递送siRNA治疗肝癌的研究[D];吉林大学;2019年

6 毛丽燕;多西他赛靶向纳米粒的构建及其抗肿瘤作用研究[D];济南大学;2019年

7 宋春丽;基于聚扁桃酸酯的药物递送体系制备及增强肿瘤治疗的研究[D];西北大学;2019年

8 刘明珠;载IR780靶向多功能纳米粒的制备及其多模态成像和光热治疗的基础研究[D];重庆医科大学;2019年

9 牟崇艳;透明质酸及聚多巴胺功能化的相变型纳米粒在乳腺癌诊疗中的研究[D];重庆医科大学;2019年

10 黎梦;载吲哚菁绿与阿霉素靶向纳米粒用于视网膜母细胞瘤体外成像的实验研究[D];重庆医科大学;2019年

本文编号：2774049