快速老化小鼠听功能、耳蜗p75表达的增龄性变化及BMSC转染的实验研究

发布时间：2017-04-03 02:11

  本文关键词：快速老化小鼠听功能、耳蜗p75表达的增龄性变化及BMSC转染的实验研究，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：目的:探讨快速老化小鼠听功能、神经生长因子受体p75在其耳蜗表达的增龄性变化特点以及为应用神经生长因子修饰的骨髓基质干细胞进行耳蜗移植治疗老年聋的实验研究提供支持。方法:选取快速老化小鼠亚系8(SAMP8)为研究对象,3、5、7月龄各6只。测定ABR反应阈值;p75在耳蜗的表达经组织免疫组化检测,并测其光密度值。分为四个转染组:A重组质粒组;B脂质体组;C空质粒组;D阴性对照组。将含NGF的质粒经脂质体转染法转至BMSC,48小时后固定于4%多聚甲醛中,免疫组化检测NGF、p75在细胞中的表达。结果:1、各组小鼠ABR阈值随着月龄增加而增高,各组间比较差异均有统计学意义。2、各月龄组小鼠耳蜗毛细胞、螺旋神经节细胞胞浆均有p75的阳性表达,且随月龄增加表达也升高,各组间比较差异均有统计学意义。3、各转染组细胞的胞浆均有棕黄色颗粒(NGF)的表达,脂质体组、空质粒组、阴性对照组表达甚微,而重组质粒组表达很明显(与其余三组比较差异有统计学意义);重组质粒组p75的表达甚微,其余三组均可见棕黄色颗粒(p75)的表达,且重组质粒组的p75的表达与其余三组的比较差异均有统计学意义。结论:随着快速老化小鼠听功能增龄性减退,p75的表达水平也随之增高,提示p75可能参与介导耳蜗功能受损的过程;转染后BMSC中p75的低表达,很可能是因为NGF转染至BMSC后,NGF能明显的抑制细胞内p75的表达水平,因此p75表达明显降低,为老年性耳聋的基因治疗提供了新的可能。
【关键词】：快速老化小鼠 老年性耳聋 耳蜗 神经生长因子受体p75 骨髓基质干细胞
【学位授予单位】：桂林医学院
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R764.436
【目录】：

• 中文摘要5-7
• ABSTRACT7-9
• 英汉缩略词表9-10
• 前言10-12
• 1 材料与方法12-17
• 1.1 实验仪器与材料12
• 1.2 实验试剂12-13
• 1.3 实验方法13-17
• 2 结果17-23
• 2.1 小鼠 ABR 阈值增龄性变化17
• 2.2 各月龄小鼠耳蜗螺旋神经节细胞、毛细胞p75的表达17-19
• 2.3 BMSC的NGF、p75免疫组化染色情况19-23
• 3 讨论23-27
• 3.1 NGF生物学特性23-24
• 3.2 神经生长因子受体p75生物学特性24
• 3.3 快速老化小鼠耳蜗神经生长因子受体p75增龄性变化24-25
• 3.4 骨髓基质干细胞与老年性耳聋25-26
• 3.5 NGF转染BMSC的培养26-27
• 4 结论27-28
• 参考文献28-34
• 附录（综述）34-46
• 参考文献42-46
• 攻读学位期间发表的学术论文目录46-47
• 致谢47-48

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