IL-6在大鼠慢性高眼压模型中对GAP-43表达影响的实验研究

发布时间：2020-10-27 15:43

　　 目的通过烧灼巩膜上静脉构建大鼠慢性高眼压模型,观察大鼠模型眼不同时期的眼压、视网膜形态学及视网膜神经节细胞(retinal ganglion cells,RGCs)数的变化。方法取35只健康雌性SD大鼠并采用随机数字表法随机分为空白对照组(5只大鼠,5只眼)、假手术组(5只大鼠,5只眼)和手术组(25只大鼠,25只眼);手术组又分为5小组(术后1天组、术后3天组、术后7天组、术后14天组和术后28天组)每组5只,采用大鼠巩膜表层的房水引流静脉烧灼法对手术组大鼠进行高眼压造模,假手术组以分开结膜不烧灼静脉做假性对照,空白对照组不做任何处理;各组均以右眼为处理眼。空白对照组、假手术组和手术组(术后28天组)分别于术前、术后30min、第1天、第3天、第5天、第7天、第14天、第28天,采用Tono Lab眼压计测量右眼眼压,并对测量值进行统计学分析;手术组各小组分别在术后第1天、第3天、第7天、第14天、第28天摘除右眼眼球,左眼做对照眼,石蜡切片,进行HE染色,观察视网膜形态变化,并统计视网膜神经节细胞数进行分析。结果眼压测量:35只大鼠(35眼)术前基线眼压是(8.4±1.75)mm Hg,手术组(术后28天组),高眼压造模烧灼巩膜上静脉30min后术眼眼压为(15.4±1.52)mm Hg,较术前基线眼压明显升高(p0.01);术后第1天、第3天、第5天、第7天、第14天、第28天测得眼压均高于空白对照组和假手术组(p0.01)。手术组各小组(术后1天组、术后3天组、术后7天组、术后14天组和术后28天组)术眼眼眼压均高于对照眼眼压(P0.01)。RGCs计数:空白对照组RGCs细胞数为30.93±3.42(个/高倍视野),光学显微镜下大鼠视网膜组织结构层次清晰,由外向内可观察到:感光层(PL)、外界膜(ELM)、外核层(ONL)、外丛状层(OPL)、内核层(INL)、内丛状层(IPL)、神经节细胞层(GCL)、神经纤维层(NFL)。手术组对照眼与空白对照组RGCs细胞数相差无统计学意义(p0.05)。手术组术后第1天,视网膜组织水肿,以NFL和IPL最明显,RGCs细胞数目较空白对照组减少4.85%,具有统计学意义(p0.05)。术后第3天、第7天、第14天,RGCs数依次减少8.63%、15.39%、16.52%及25.06%,晚期视网膜水肿逐渐消肿、萎缩、变薄。假手术组和空白对照组相比,RGCs数差异无明显统计学意义(p0.05)。结论成功建立大鼠慢性高眼压动物模型,其视网膜神经节细胞减少可能与持续高眼压相关。目的观察白细胞介素-6(Interleukin-6,IL-6)在大鼠慢性高眼压模型中,对生长相关蛋白-43(Growth asociated protein-43,GAP-43)在大鼠视网膜中的表达影响,探讨其对视网膜神经节细胞(retinal ganglion cells,RGCs)的相关作用,为临床RGCs的保护性治疗提供实验依据。方法取80只健康雌性SD大鼠随机分为空白对照组、慢性高眼压组、IL-6治疗组和治疗对照组4组,每组20只(20只眼)。慢性高眼压组、IL-6治疗组和治疗对照组分别进行高眼压造模,空白对照组不做处理;造模后一周眼压稳定,IL-6治疗组进行玻璃体腔注射IL-6 300ng,治疗对照组玻璃体腔注射等量生理盐水;根据用药前后观察时间将4组各分为4个小组(每小组5只大鼠,5只眼),各组分别于用药前,用药后第1天、第7天、第14天摘除眼球,制作蜡块切片,分别进行HE染色及免疫组织化学染色。观察视网膜形态变化,量化RGCs及分析GAP-43表达的积分光密度,进行统计分析。结果用药前与用药后第1天、第7天、第14天,慢性高眼压组、IL-6治疗组和治疗对照组之间眼压值差异无统计学意义(P0.05);均比空白对照组眼压高(p0.01)。用药前及用药后第1天,IL-6治疗组、慢性高眼压组和治疗对照组之间RGCs计数差异无统计意义(P0.05),但均较空白对照组RGCs计数减少(p0.01)。用药后第7天、第14天,慢性高眼压组比IL-6治疗组RGCs数目减少明显,差异显著(P0.05);慢性高眼压组和治疗对照组之间RGCs计数差异无统计学意义(P0.05),3组均较空白对照组RGCs计数减少(p0.01)。IL-6治疗组在观察时间内RGCs计数维持稳定(P0.05),均高于慢性高眼压组和治疗对照组RGCs计数(P0.01),但仍较空白对照组RGCs计数少(P0.05)。治疗对照组和慢性高眼压组在观察时间内RGCs计数均呈逐渐减少的趋势(P0.05)。GAP-43表达于各组神经纤维层、RGCs、以及内丛状层。用药前及用药后第1天,IL-6治疗组、慢性高眼压组与治疗对照组之间GAP-43表达密度差异无统计学意义(P0.05),但均较空白对照组增强(P0.01)。用药后第7天、第14天,慢性高眼压组和治疗对照组GAP-43表达逐渐减少(P0.05),甚至接近正常组;而IL-6治疗组在观察期内GAP-43表达稳定增强,差异显著(P0.05)。结论在大鼠慢性高眼压模型中,IL-6可能通过促进GAP-43的表达来调控RGCs的存活率。
【学位单位】：福建医科大学
【学位级别】：硕士
【学位年份】：2015
【中图分类】：R775.2
【文章目录】：
英文缩略词表
前言
第一部分 建立大鼠慢性高眼压模型
    摘要
    英文摘要
    材料与方法
    结果
    讨论
    结论
第二部分 IL-6 在大鼠慢性高眼压模型中对GAP-43的表达影响
    中文摘要
    英文摘要
    材料与方法
    结果
    讨论
    结论
    参考文献
综述
    参考文献
致谢

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本文编号：2858716