鼻咽癌中COX-2通过抑制治疗诱导的衰老促进治疗抵抗的研究

发布时间：2020-10-29 15:00

　　 研究背景和研究目的:鼻咽癌是起源于鼻咽上皮细胞的恶性肿瘤,好发于中国南方及东南亚各国。在初诊的鼻咽癌患者中,约有70%已经发展为晚期。尽管鼻咽癌对放疗敏感,但是鼻咽癌患者的预后仍然不良,五年生存率仅为34%~52%。导致预后不良的主要原因是,鼻咽癌患者治疗后的复发及远处转移。治疗诱导的衰老是由于原癌基因的异常激活,氧化应激反应,不依赖于端粒酶异常的DNA损伤导致的。有研究结果表明,肿瘤细胞在经过抗癌药物(如阿霉素、铂类、紫杉醇等)处理后会发生衰老,提示衰老可能是抗癌药物起效的重要细胞反应。环氧合酶(cyclooxygenase,COX)是前列腺素合成反应的限速酶。包含有环氧合酶1和环氧合酶2(COX-2)。其中,环氧合酶1在各种组织中稳定表达,在组织内环境稳态中发挥重要作用。而COX-2是诱导型酶,在炎症及损伤时参与前列腺素的生产。COX-2也在多种肿瘤中高表达,包括乳腺癌、卵巢癌、结直肠癌及鼻咽癌等。迄今为止,放化疗抵抗的机制依然是鼻咽癌治疗最关键的临床问题。我们的研究目的是研究COX-2在鼻咽癌患者初诊和复发时的表达情况,以及COX-2在鼻咽癌中促进治疗抵抗的作用和机制。研究方法:1.我们利用免疫组织化学染色研究,COX-2高表达与鼻咽癌患者的复发,淋巴结转移和生存期的关系。利用同一患者初诊和复发时的石蜡切片,研究COX-2在复发与初诊时的表达情况。2.运用蛋白印迹法检测了正常鼻咽上皮细胞系和鼻咽癌细胞系COX-2表达水平,建立稳定敲减及过表达COX-2的鼻咽癌细胞系。采用CCK8、平板克隆形成实验、细胞周期实验、衰老染色实验研究COX-2在肿瘤细胞增殖、衰老、耐药方面的作用。3.从COX-2敲除小鼠及野生型同窝小鼠中获取肺和皮肤成纤维细胞,进行原代细胞培养,用于检测顺铂处理后,成纤维细胞的衰老情况,探究COX-2在衰老方面的作用。4.借助裸鼠实验,研究鼻咽癌细胞系COX-2表达水平对肿瘤细胞增殖的影响,以及肿瘤组织中,衰老通路相关的p53表达情况。5.通过蛋白质免疫共沉淀方法检测鼻咽癌细胞系中,COX-2与p53蛋白的结合情况。利用p53抑制剂,探究p53在治疗诱导的衰老方面的作用。研究结果:1.研究显示,COX-2高表达影响鼻咽癌患者的复发,转移和生存期(P0.05)。为进一步探究其与复发的关系,我们获取同一患者,初诊和复发时的石蜡切片,发现COX-2在复发时表达强于初诊(P0.01)。2.敲减COX-2细胞增殖能力减弱(P0.01),过表达COX-2细胞增殖能力增强(P0.01)。敲减COX-2后,对顺铂、紫杉醇耐药性减弱(P0.05),过表达COX-2后,对顺铂、紫杉醇耐药性增强(P0.05),过表达COX-2后,鼻咽癌细胞对放疗的抵抗性增强(P0.01)。敲减COX-2后,顺铂处理后衰老细胞百分比增多(P0.01),过表达COX-2后,顺铂处理后衰老细胞百分比减少(P0.01)。3.COX-2缺失可以促进小鼠成纤维细胞的衰老(P0.01),COX-2缺失可能通过p53影响小鼠成纤维细胞的衰老。4.在敲减COX-2的鼻咽癌细胞中,发现肿瘤形成能力有所减弱(P0.05),免疫组化发现Ki-67表达较弱,p53表达较强。5.通过蛋白质免疫共沉淀方法验证,在鼻咽癌细胞系中COX-2可以与p53进行蛋白与蛋白的结合。应用p53抑制剂PFT-α,抵消敲减COX-2导致的顺铂处理后衰老细胞百分比增多的作用。研究结论:1.COX-2高表达与鼻咽癌患者的淋巴结转移、复发及不良预后有关,COX-2在复发时表达强于初诊;2.COX-2通过与p53相结合抑制p53,促进肿瘤细胞增殖,影响化疗药物诱导的细胞衰老,并导致鼻咽癌细胞系耐药。
【学位单位】：吉林大学
【学位级别】：博士
【学位年份】：2018
【中图分类】：R739.63
【部分图文】：

肿瘤细胞中表达较强。11 例慢性鼻咽炎上皮标本中仅 4 例有 COX阳性表达（+），阳性率为 36%（4/11）； 43 例肿瘤标本中有 34 例 COX阳性表达（+），阳性率为 79%（34/43）。慢性鼻咽炎上皮中的 COX-2 阳率和肿瘤相比，均有显著性意义（P<0.01），见图 2.1 及 2.2。以上结果提示咽癌患者组织中 COX-2 表达显著增高。进一步按肿瘤细胞中 COX-2 表达将肿瘤患者分为 COX-2 高表达组（3~6 分）16 例和 COX-2 低表达组（027 例。结果显示，COX-2 高表达组与低表达组在淋巴结转移状态（P<0.05复发（P<0.05）及患者生存状态均有显著性意义（P<0.05），见表 2.2。并且 COX-2 表达高低分为两组，运用 Kaplan-Meier 分析方法得出，COX-2 高鼻咽癌患者的生存期更短（P<0.05），见图 2.3。

结果显示，COX-2 高表达组与低表达组在淋巴结转移状态（P<0.05）及患者生存状态均有显著性意义（P<0.05），见表-2 表达高低分为两组，运用 Kaplan-Meier 分析方法得出，C癌患者的生存期更短（P<0.05），见图 2.3。A B图 2.1 免疫组织化学慢性鼻咽炎与鼻咽癌 COX-2 蛋白Figure 2.1 COX-2 expression in chronic nasopharyngitinasopharyngeal carcinoma by IHCA : 鼻咽上皮 B : 鼻咽癌组织

表 2.2 鼻咽癌中 COX-2 表达与患者临床相关性Table 2.2 Association between COX-2 expression and clinicacharacteristics of patients with NPC
【相似文献】

相关期刊论文 前10条

1 廖维婷;陈文勇;;鼻咽癌相关基因的研究进展[J];中医耳鼻喉科学研究;2011年02期

2 黎骋;郑裕明;郭俊宇;马丽萍;陆爱英;汤敏中;吴惠惠;蔡永林;;鼻咽癌组织中多聚免疫球蛋白受体的表达及意义[J];山东医药;2015年46期

3 叶浩昕;范绍翀;潘永;钟晓声;李江;戴智梅;严睿成;;鼻咽癌组织血管生成拟态观察及其意义[J];山东医药;2016年20期

4 陈帅君;江珊珊;刘芳;万良财;张宏征;许熠铭;张涛;刘涛;谢民强;;叶酸受体在鼻咽癌组织中的表达及其意义[J];实用医学杂志;2015年02期

5 江河;司勇锋;兰桂萍;翁敬锦;韦海明;;微血管及微淋巴管在鼻咽癌组织中表达情况研究[J];河北医学;2015年06期

6 刘汝洋;高国芬;杜志华;;鼻咽癌组织中iNOS的表达与微血管密度计数的研究[J];泰山医学院学报;2015年01期

7 李祖云;潘登华;钟腾飞;罗义欢;王翰林;陈罡;;诱导型一氧化氮合酶蛋白在鼻咽癌组织中的表达及临床意义[J];实用医技杂志;2015年09期

8 彭忠异;阮萍;李筱;梁海萍;张锡流;;鼻咽癌组织微电流、表皮生长因子受体与鼻咽癌分化的关系[J];广西医学;2014年08期

9 白薇琦;胡宝华;汤建国;李旋;黄蓉;俞吉霞;顾利萍;;环氧化酶-2和血管内皮生长因子在鼻咽癌组织中的表达及相关性[J];临床耳鼻咽喉头颈外科杂志;2012年09期

10 廖秋林;张卫云;张宏斌;崔华娟;陈炳旭;张伟;陈晓东;;鼻咽癌组织中ICAM-1和HSP70蛋白的表达及其意义[J];中华全科医学;2012年05期

相关博士学位论文 前10条

1 张远;miR-19b通过靶向KRAS调控鼻咽癌发生、发展和耐药的机制研究[D];郑州大学;2018年

2 石琛;鼻咽癌中COX-2通过抑制治疗诱导的衰老促进治疗抵抗的研究[D];吉林大学;2018年

3 石卫民;鼻咽癌患者常规放疗的生活质量与血清细胞因子水平的相关研究[D];南方医科大学;2013年

4 叶艳芬;EBV-miR-BART1调控靶基因PTEN促进鼻咽癌转移的分子机制[D];南方医科大学;2013年

5 李烨;基于磁共振检查对血清胸苷激酶1检测在初治鼻咽癌综合诊断和疗效评估中价值的研究[D];广西医科大学;2017年

6 李本珊;羟喜树碱通过TGF-β诱导的PI3K/AKT通路抑制鼻咽癌进展的机制研究[D];南方医科大学;2018年

7 冯晓华;CCNE1在鼻咽癌中的表达、功能及分子机制的初步研究[D];南方医科大学;2018年

8 张自新;RPA1对鼻咽癌放射敏感性的影响及其机制研究[D];重庆医科大学;2018年

9 毕永华;miR-25靶向RAGE调控鼻咽癌生物学行为的实验研究[D];安徽医科大学;2017年

10 于斌;治疗前外周血NLR与VEGF-460T/C SNP对鼻咽癌患者疗效预测价值的探索[D];广西医科大学;2017年

相关硕士学位论文 前10条

1 李旭梅;广西莪术中抗鼻咽癌活性成分开发及应用[D];桂林医学院;2018年

2 李进邦;鼻咽癌中关键抑癌基因PTEN CpG岛异常甲基化状态及其机制研究[D];南方医科大学;2015年

3 韦黎黎;GLRX3在鼻咽癌中的表达及其致癌功能的研究[D];广西医科大学;2014年

4 刘宇轩;鼻咽癌中DNA甲基化转移酶表达水平的分析[D];桂林医学院;2018年

5 王志强;YAP、MST1、CyclinD1在鼻咽癌中的表达及临床意义[D];桂林医学院;2018年

6 林中原;CYFIP1过表达对鼻咽癌细胞增殖、迁移能力影响的研究[D];广西医科大学;2017年

7 邓永然;热疗对鼻咽癌CNE2细胞转录组基因表达的影响[D];广西医科大学;2018年

8 谭钧尹;VEGF基因启动子区-460T/C、-1154G/A单核苷酸多态性与鼻咽癌预后的相关性研究[D];广西医科大学;2015年

9 吴媛;鼻咽癌与淋巴管内皮细胞交互作用的转录组研究[D];广西医科大学;2015年

10 王燕;HDAC抑制剂Quisinostat对鼻咽癌CNE1细胞增殖抑制与诱导凋亡作用的研究[D];大连医科大学;2018年

本文编号：2861063