骨髓间充质干细胞保护感光细胞的机制探讨

发布时间：2017-04-05 18:08

  本文关键词：骨髓间充质干细胞保护感光细胞的机制探讨，，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：目的:研究大鼠视网膜强光照射后组织结构和功能的变化;探讨视网膜下腔移植BMSCs(Bone marrow mesenchymal stem cells,骨髓间充质干细胞)对光损伤视网膜感光细胞的保护作用及可能的机制。方法:1.视网膜光损伤大鼠造模:将SD大鼠分别放入自制光照模具内,以4k Lux(kilo-Lux,千勒克斯)强光循环照射大鼠,分别持续3d(Day,天)、5d、7d、9d、12d后,于F-ERG(Flash electroretinogram,闪光视网膜电图)检测后摘除眼球,行HE(Hematoxin-eosion,苏木-伊红)染色,观察大鼠视功能和视网膜组织结构的变化情况。2.视网膜下腔移植GFP-BMSCs(Green fluorescence protein-Bone marrow mesenchymal stem cells,表达绿色荧光蛋白的骨髓间充质干细胞):实验大鼠随机分成正常对照组、光损伤组、DMEM(Dulbeccos modified eagles medium,改良必须培养基)组和BMSCs组。将3-5P的GFP-BMSCs和DMEM注射入光损伤视网膜下腔,分别于移植后第1w(Week,周)、4w、8w、12w行F-ERG检测后摘取眼球,TEM(Transmission electron microscope,透射电镜)观察感光细胞外节组织变化;免疫荧光染色观察移植12w后,细胞迁移整合情况并比较各组Rho(Rhodopsin,视紫红质)残余量;HE染色对比视网膜外核层厚度改变;蛋白印迹检测光损伤后不同处理组第1d、3d、1w、2w、4w、6w、8w、12w的GS(Glutamine synthetase,谷氨酰胺合成酶)、GDNF(Glial cell line-derived neurotrophic factor,胶质细胞源性神经营养因子)表达量变化。结果:1.F-ERG检测显示光暴露后,视网膜功能受损(p0.05),外核层的厚度变薄(p0.05),二者均随着光暴露时间延长损伤加剧,功能和形态学改变表现出一致性。但光暴露5d以内和9d以后,视网膜外核层厚度变薄的速度均较慢。2.视网膜下腔移植GFP-BMSCs可延缓光损伤视网膜外核层厚度变薄(p0.05);F-ERG显示BMSCs注射组视网膜功能较光损伤组和DMEM组明显提高(p0.05);TEM观察到BMSCs组的感光细胞外节结构损伤较轻;免疫荧光染色观察到GFP-BMSCs仅极少量向外层视网膜组织迁移;BMSCs组Rho残余量显著高于光损伤组和DMEM组(p0.05);Western Blot检测结果示:视网膜下腔注射组的GS在移植后第3d时降至最低,随后进行性升高到第2w,但BMSCs组的表达量始终高于其他光暴露组(p0.05),GDNF在BMSCs组的表达量亦较高,但其峰值在第1w时。结论:视网膜下腔移植GFP-BMSCs对光损伤视网膜的感光细胞有保护作用,移植的BMSCs自身分泌同时促进宿主视网膜分泌GDNF等神经保护因子,使GS表达上调,提高抵御兴奋性神经毒性的能力,上述直接和间接方式可能是其发挥保护作用的机制。
【关键词】：骨髓间充质干细胞 视网膜下腔移植 视网膜光损伤 感光细胞 机制
【学位授予单位】：福建医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R774.1
【目录】：

• 附录4-5
• 中文摘要5-7
• 英文摘要7-9
• 前言9-12
• 第一部分 视网膜光损伤大鼠模型研究12-19
• 1 材料12-13
• 2 方法13-15
• 3 结果15-17
• 4 讨论17-19
• 第二部分 骨髓间充质干细胞保护光损伤感光细胞的研究19-37
• 1 材料19-20
• 2 方法20-24
• 3 结果24-33
• 4 讨论33-37
• 结论37-38
• 参考文献38-43
• 综述43-55
• 参考文献50-55
• 致谢55-56

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前2条

1 苏吉儿;丁静文;韩松;罗宏;李俊发;;Müller细胞反应性胶质化在急性高眼压致大鼠视网膜损伤中作用[J];基础医学与临床;2013年02期

2 李筱荣;张晓敏;;间充质干细胞在视网膜疾病中的临床应用展望[J];眼科;2011年04期

  本文关键词：骨髓间充质干细胞保护感光细胞的机制探讨，由笔耕文化传播整理发布。

本文编号：287457