miR-19b-3p靶向LRIG1调控喉癌细胞凋亡和放射敏感性分子机制研究

发布时间：2021-03-10 01:13

　　目的:探讨miR-19b-3p是否通过靶向调控富含亮氨酸重复和免疫球蛋白样结构域（LRIG1）表达从而对喉癌细胞凋亡及放射敏感性的影响。方法:喉癌Hep2细胞分为anti-miR-19b-3p组、anti-miR-NC组、pcDNA-LRIG1组、pcDNA组、anti-miR-19b-3p+si-LRIG1组、anti-miR-19b-3p+si-NC组、miR-19b-3p组、miR-NC组。实时荧光定量PCR（qRT-PCR）与蛋白免疫印迹（Western blot）分别检测miR-19b-3p、LRIG1表达水平;采用流式细胞术检测各组细胞凋亡率。采用克隆形成实验检测各组细胞的放射敏感性。双荧光素酶报告基因实验验证LRIG1是否为miR-19b-3p的靶基因;Western blot检测细胞中Bcl-2、Bax、cleaved-caspase3的表达。结果:miR-19b-3p在喉癌组织及细胞系中表达水平显著升高,而LRIG1表达水平显著降低;转染anti-miR-19b-3p或pcDNA-LRIG1后可显著增强喉癌细胞凋亡能力并降低细胞存活分数从而增强细胞的放射敏感性,促进B... 

【文章来源】：中国免疫学杂志. 2020,36(12)北大核心

【文章页数】：7 页

【部分图文】：

miR-19b-3p和LRIG1在喉癌组织中的表达

Western blot实验检测LRIG1过表达转染效果,如图4A所示,pcDNA-LRIG1组喉癌Hep2细胞中LRIG1的蛋白表达水平较pcDNA组显著升高(P<0.05),提示转染成功。pcDNA-LRIG1组喉癌Hep2细胞凋亡率相较于pcDNA组显著升高(P<0.05),明显促进Bax表达(P<0.05),而抑制Bcl-2表达(P<0.05),进一步用不同剂量X线照射结果显示,与pcDNA组相比,pcDNA-LRIG1组喉癌Hep2细胞存活分数明显降低(P<0.05),细胞增敏比(SER)为1.788,见图4、表2。表明LRIG1过表达可能通过促进喉癌Hep2细胞凋亡进而增强放射敏感性。图3 抑制miR-19b-3p表达对喉癌Hep2细胞放射敏感性的影响

抑制miR-19b-3p表达对喉癌Hep2细胞放射敏感性的影响


本文编号：3073794