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miRNA-451对RF/6A视网膜血管内皮细胞的生物学影响

发布时间:2021-03-10 03:22
  研究目的探究miRNA-451对RF/6A视网膜血管内皮细胞的增殖、迁移及管腔形成能力等生物学特征的影响及其可能的机制,为增殖性糖尿病视网膜病变的治疗提供理论基础。方法1.利用脂质体转染法将miRNA-451的类似物(mimic)和抑制剂(inhibitor)转染进RF/6A细胞中,测定转染效率。2.将RF/6A细胞分为四个组:miRNA-451 mimic组、miRNA-451 mimic control(类似物对照)组、miRNA-451 inhibitor组、miRNA-451 inhibitor control(抑制剂对照)组,利用CCK-8检测细胞增殖能力,细胞划痕实验和Transwell迁移实验检测细胞迁移能力,Matrigel管腔形成实验观察细胞形成管腔的能力。RT-PCR检测与生物学行为相关基因的表达情况。3.以miRNA-451为研究对象,利用mi RBase、mi Randa、Target Scan、Pic Tar等数据库对miRNA-451的作用靶点进行生物信息学分析,为实验提供理论指导和依据。4.利用SPSS 19.0软件对实验结果进行统计学分析。组间的两两比较... 

【文章来源】:天津医科大学天津市 211工程院校

【文章页数】:73 页

【学位级别】:硕士

【部分图文】:

miRNA-451对RF/6A视网膜血管内皮细胞的生物学影响


RF/6A细胞正常形态(标尺200um)

转染,转染效率


图 1. RF/6A 细胞正常形态 (标尺 200um)1.2.2 转染效率检测结果6h 后观察,各个浓度的 miRNA 均可将在蓝光的激发下发出绿色荧光,且转染效率较高。比较各个浓度的荧光结果发现,miRNA-451 mimic 组在 20uM 时即有较高的转染效率,inhibitor 组在 80uM 的转染效率较高(图 2)。

细胞增殖,方法,情况


1.2.3 CCK-8 细胞增殖结果结果发现,利用 CCK-8 检测细胞的增殖能力,mimic 组与 mimic control 组相比较,24h 时,mimic 组(1.049±0.020)较 mimic control 组(1.258±0.034)低,结果有统计学差异(F=0.413,P=0.000)。48h 时 mimic 组(1.223±0.077)较 mimiccontrol 组(1.400±0.037)低,结果具有统计学差异(F=2.401,P=0.002)。inhibitor组与 inhibitor control 组相比较,24h 时,两组间无统计学差异(P>0.05),48h时,inhibitor 组(1.748±0.023)较 inhibitor control 组(1.689±0.421)高,结果有统计学差异(F=1.407,P=0.000)。(图 3)

【参考文献】:
期刊论文
[1]MicroRNA: a new and promising potential biomarker for diagnosis and prognosis of ovarian cancer[J]. Manish K.Pal,Shyam P.Jaiswar,Vinaya N.Dwivedi,Amit K.Tripathi,Ashish Dwivedi,Pushplata Sankhwar.  Cancer Biology & Medicine. 2015(04)
[2]Implication of platelet-derived growth factor receptor alpha in prostate cancer skeletal metastasis[J]. Danielle Jernigan,Alessandro Fatatis.  癌症. 2011(09)



本文编号:3073968

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