MiR-200b通过调控PIK3CA/AKT通路抑制大鼠角膜血管新生

发布时间：2021-04-10 01:55

　　目的探讨microRNA-200b（miR-200b）在大鼠角膜新生血管（corneal neovascularization, CNV）形成中的作用及其调节机制。方法 24只雌性SD大鼠采用一眼经缝线法构建CNV模型（实验组）,另一眼作为正常对照组,于裂隙灯下观察建模后第4、7、14天角膜新生血管情况,采用HE染色观察角膜组织结构改变及炎性细胞浸润情况,RT-PCR检测造模后第14天各组大鼠角膜组织中miR-200b以及血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor, VEGF）的表达。利用脂质体转染人脐静脉内皮细胞（human umbilical vein endothelial cells, HUVECs）,分为miR-200b模拟物（miR-200b mimic）组、阴性对照（miR-NC）组、空白对照（CON）组,利用RT-PCR验证转染效果,分别采用CCK-8检测HUVECs增殖能力,划痕实验检测HUVECs迁移能力,Matrigel胶成管实验检测HUVECs管腔形成能力。并通过Western blot检测VEGF及PIK3CA、AK... 

【文章来源】：第三军医大学学报. 2020,42(04)北大核心CSCD

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【部分图文】：

缝线法构建大鼠CNV模型 (×20)

取正常和缝线后第14天角膜组织,采用RT-PCR检测miR-200b/VEGF的表达,结果显示:缝线后第14天,角膜组织中miR-200b表达明显降低,而VEGF表达明显升高,差异有统计学意义(P<0.01,图3)。图3 RT-PCR检测miRNA-200b、VEGF在两组大鼠CNV 中的表达

RT-PCR检测miRNA-200b、VEGF在两组大鼠CNV 中的表达


本文编号：3128724