异种脱细胞结膜基质移植修复兔结膜缺损的实验研究

发布时间：2021-07-15 21:19

　　目的探讨脱细胞结膜的制备方法,并观察其移植修复兔结膜缺损的可行性。方法1.脱细胞结膜基质的制备取新鲜猪球结膜（宰后3小时,其仅含少许结膜下组织）先用0.2%戊二醛处理5min,再用0.25%胰酶/0.02%EDTA、1%TritonX-100、或两者联合进行脱细胞处理,根据DAPI染色结果筛选出合适的结膜脱细胞方法,脱细胞处理后,将结膜置于超净台内通风干燥、紫外消毒8h备用。2.脱细胞结膜基质的相关检测使用可见分光光度计检测检测脱细胞结膜基质的透光性,细菌、真菌培养行微生物检测,免疫组织化学法检测其抗原性,MTT法检测细胞毒性。3.异种脱细胞结膜作为移植材料,修复兔结膜缺损的应用（1）兔结膜缺损动物模型的建立游离去除实验兔鼻上方约20mm×8mm球结膜、筋膜,并剪除对应部分睑结膜。（2）移植材料的动物模型随机将20只新西兰大白兔分成4组,每组5只。A组移植制备的脱细胞结膜基质;B组移植羊膜;C组移植未脱细胞异种结膜;D组不给予治疗。术后3天,1周,2周,行结膜荧光素钠染色大体观察对照组及实验组结膜愈合、结膜囊狭窄、结膜粘连和血管化情况;术后1周,2周,6周取材处死实验组兔分别行HE染色... 

【文章来源】：济南大学山东省

【文章页数】：42 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

脱细胞结膜基质的大体像

济南大学硕士学位论文表 1 脱细胞结膜基质与去上皮羊膜的吸光度及透光度波长（nm）脱细胞结膜基质 去上皮羊膜吸光度 透光度 吸光度 透光度4005006007000.354 0.646 0.583 0.4170.346 0.654 0.532 0.4680.283 0.717 0.461 0.5390.178 0.822 0.357 0.643800 0.013 0.987 0.192 0.808

图 4 脱细胞结膜基质脱细胞结膜基质的抗原性检测结果（200 倍） A 未脱细胞的 PCK 抗原表达 B 未脱细胞结膜的阴性对照 C 脱细胞结膜基质无 PCK 抗原表达 D的阴性对照脱细胞猪结膜基质中无 PCK 抗原的表达（图 4C），而未脱细胞的猪结颗粒的 PCK 抗原的表达（图 4A）。2.4 脱细胞结膜基质的细胞毒性试验（MTT 法）测量各组培养 1 天、3 天、5 天、7 天之后的吸光度（A）值，并根据结过统计分析，实验组与阴性对照组 P 值为 0.729，结果无统计学意义，即组无差异。绘制细胞增殖曲线（图 5）。以上结果显示实验组与对照组的细好，二者无明显差异。证明脱细胞猪结膜基质无细胞毒性，具有良好的细根据实验组、阴性对照组及空白对照组的 A 值计算出细胞 RGR，对照性分级标准表格，得出脱细胞猪结膜基质毒性为 1 级，合格，见表 2。

【参考文献】：
期刊论文
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本文编号：3286482