C57BL/6J小鼠耳蜗内外毛细胞胞吞功能的实验研究

发布时间：2021-08-02 04:17

　　研究背景和目的:感音神经性耳聋是临床上导致言语交流障碍的一种常见疾病,严重了影响人们日常生活质量,目前在临床上治疗感音神经性耳聋的方法有很多,但是治疗效果不尽人意,因此寻找耳蜗听力形成与维持的分子机制,成为未来感音神经性耳聋治疗新的方向。听觉的产生和维持依赖于耳蜗内毛细胞（Inner hair cell,IHC）带状突触部（Ribbon Synapse,RS）释放神经递质,由此完成机械一电换能作用。作为听觉传入神经第一级神经突触,耳蜗感受器感受到的声音信号是靠IHC及其突触完成的,IHC突触能够精确快速地传递神经递质,需要正常有效的神经递质循环机制,即囊泡的胞吐活动和胞吞活动。突触囊泡循环是听觉神经递质持续释放的基础,而突触囊泡精确快速的内吞作用则是突触囊泡信息持续传递不被耗竭的重要保障;本研究探讨体外培养的乳鼠耳蜗IHC的有无胞吞功能。通过对成熟小鼠耳蜗IHC和外毛细胞（Outer hair cell,OHC）的胞吞进行动态观察和比较,以探讨成熟小鼠IHC和OHC胞吞功能与动物听功能之间的关系,为以后深入探讨耳蜗毛细胞在听力形成和维持的重要生理机制提供实验依据,为感音神经性耳聋新的治... 

【文章来源】：川北医学院四川省

【文章页数】：67 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

小鼠耳蜗组织解剖取材过程

外培养5天后，在倒置显微镜下观察培养BM组织与鼠尾胶原胶粒贴附良好，BM完整，形态结构清晰，IHC生长良好，OHC在体外培养过程中由于有BM外侧的成纤维细胞生长，部分BM生长稍松散，但生长正常（图2）。图2 为倒置显微镜下观察经过5天培养的C57BL/6J小鼠耳蜗BM，组织贴附良好，形态结构清晰，IHC和OHC细胞存活良好(Bar=30um)。3.2 不同时间点耳蜗BM体外培养情况观测体外培养的BM组织经TRITC-phalloidin染色纤毛后观察耳蜗BM生长情况，离体小鼠耳蜗BM培养第1天后生长良好，毛细胞区域内的细胞排列紧密，结构清晰，IHC和OHC均存活良好，纤毛排列良好(图3A)。离体小鼠耳蜗BM培养第3天后生长良好，IHC和OHC结构紧密，无松散，IHC和OHC未见纤毛倒伏(图3B)。离体小鼠耳蜗BM培养第5天后生长良好

11图3 不同天数体外培养的毛细胞生长情况注：图A：离体培养1天的乳鼠BM，TRITC-phalloidin染色，IHC和OHC排列紧密，结构清晰，无松散，纤毛排列规则(bar=20μm )。图B：离体培养3天的乳鼠BM，TRITC-phalloidin染色，IHC和OHC排列仍紧密，结构无松散，纤毛及表皮板结构基本完整(bar=20μm )。图C：离体培养5天的乳鼠BM

【参考文献】：
期刊论文
[1]小鼠耳蜗神经及其与内毛细胞突触后谷氨酸受体发育的特点[J]. 杨华,甘霖,陈晓巍,高志强.  协和医学杂志. 2012(02)
[2]应用三维建模方法定量分析C57BL/6J小鼠耳蜗内毛细胞带状突触的数量[J]. 柳柯,李姝娜,姜学钧.  中国科学（C辑:生命科学）. 2009(02)
[3]小鼠耳蜗的形态学发育过程[J]. 李春晖,杜波,丁大连,杜宝东.  解剖科学进展. 2008(02)



本文编号：3316874