MEK/ERK信号传导通路在缺氧诱导的外层血—视网膜屏障损伤中的作用
发布时间:2021-08-21 16:33
目的建立ARPE-19细胞缺氧模型,探讨缺氧条件下视网膜色素上皮细胞(retina pigment epithelium, RPE) MEK/ERK信号传导通路与细胞问紧密连接蛋白的改变,以及影响紧密连接的血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor, VEGF)的变化。方法ARPE-19细胞复苏后取对数生长期细胞,利用化学制剂二氯化钴(CoCl2)诱导其缺氧模型。将细胞培养于60×15mm细胞培养皿中,取6份细胞随机均分为缺氧组和正常对照组,缺氧组培养基中加入浓度为200μM的二氯化钻(CoCl2),而正常对照组中加入等量的二甲基亚砜(DMSO)。3小时后利用Western Blot检测各组细胞中缺氧诱导因子(hypoxia-inducible factor-1a, HIF-1α)以明确细胞缺氧情况,之后以Western Blot检测在缺氧环境下ARPE细胞中p-ERK/t-ERK的随时间变化曲线(每间隔0.5小时检测一次,共3小时),24小时检测细胞间紧密连接蛋白之一的密封蛋白(occludin)的变化,并于3,6,12,24小时利用ELI...
【文章来源】:中南大学湖南省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校
【文章页数】:96 页
【学位级别】:博士
【文章目录】:
摘要
Abstract
中英文对照
前言
第一章 缺氧条件下ARPE-19细胞中MEK/ERK信号传导通路与细胞间紧密连接蛋白的变化
1.1 材料与方法
1.2 结果
1.3 讨论
1.4 小结
第二章 阻断MEK/ERK信号传导通路对缺氧条件下ARPE-19细胞间紧密连接的保护作用
2.1 材料与方法
2.2 结果
2.3 讨论
2.4 小结
第三章 阻断MEK/ERK信号传导通路对OIR小鼠模型中外层血-视网膜屏障的保护作用
3.1 材料与方法
3.2 结果
3.3 讨论
3.4 小结
结论
参考文献
综述
参考文献
致谢
攻读学位期间的主要研究成果
【参考文献】:
期刊论文
[1]p38MAPKs在细胞周期调控中的作用[J]. 陈奕,缪泽鸿,丁健. 生理科学进展. 2004(04)
本文编号:3355956
【文章来源】:中南大学湖南省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校
【文章页数】:96 页
【学位级别】:博士
【文章目录】:
摘要
Abstract
中英文对照
前言
第一章 缺氧条件下ARPE-19细胞中MEK/ERK信号传导通路与细胞间紧密连接蛋白的变化
1.1 材料与方法
1.2 结果
1.3 讨论
1.4 小结
第二章 阻断MEK/ERK信号传导通路对缺氧条件下ARPE-19细胞间紧密连接的保护作用
2.1 材料与方法
2.2 结果
2.3 讨论
2.4 小结
第三章 阻断MEK/ERK信号传导通路对OIR小鼠模型中外层血-视网膜屏障的保护作用
3.1 材料与方法
3.2 结果
3.3 讨论
3.4 小结
结论
参考文献
综述
参考文献
致谢
攻读学位期间的主要研究成果
【参考文献】:
期刊论文
[1]p38MAPKs在细胞周期调控中的作用[J]. 陈奕,缪泽鸿,丁健. 生理科学进展. 2004(04)
本文编号:3355956
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