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自身免疫性葡萄膜炎发病过程中Th17/Treg细胞及其相关炎性因子的动态表达研究

发布时间:2021-09-30 22:32
  目的:1.研究以Behcet病、VKH综合征为代表的自身免疫性葡萄膜炎患者外周血中Th17细胞、Treg细胞及相关细胞因子的表达,及其在疾病的活动期、静止期的表达特征;2.研究实验性自身免疫性葡萄膜炎(EAU)大鼠模型中Th17细胞、Treg细胞及相关细胞因子在不同病程中的动态表达,并分析Th17/Treg表达失衡与EAU发病的关系。方法:1.收集活动期和静止期的Behcet病、VKH综合征患者及健康人外周静脉血4ml,采用流式细胞仪检测Th17、Treg细胞的比例变化;ELISA检测血清中IL-17、IL-6、IL-10、TGF-β细胞因子的浓度变化;2.在6-8周龄Lewis大鼠两足底、腹壁两侧和脊背中央5点皮下注射用光感受器间维生素A类结合蛋白(IRBP1177-1191)、完全弗氏佐剂(CFA)和结合菌素(TB)充分混匀的乳糜液共300ul构建EAU大鼠模型。免疫后每天用Genesis-D眼部照相机观察大鼠眼部炎症变化,并进行临床评分;分别于免疫后9、13、18、23天摘取大鼠眼球做HE病理染色,比较大鼠眼组织病理学差异;分别于免疫后9、13、18、23、28、35、48天处死... 

【文章来源】:山东中医药大学山东省

【文章页数】:81 页

【学位级别】:硕士

【文章目录】:
提要
ABSTRACT
引言
第一部分 Th17/Treg细胞及相关炎性因子在葡萄膜炎患者发病过程中的动态表达
    引言
    1 实验材料
        1.1 研究对象
        1.2 试剂
        1.3 主要实验仪器
    2 方法
        2.1 样本收集
        2.2 单核细胞(PBMC)的分离
        2.3 流式细胞仪检测
        2.4 ELISA检测
        2.5 统计学分析
    3 结果
        3.1 外周血Th17、Treg细胞表达
        3.2 血清中IL-17、IL-6、Foxp3和TGF-β的表达
    讨论
    小结
第二部分 EAU大鼠模型建立及病程观察
    引言
    1 实验材料
        1.1 实验动物
        1.2 试剂
        1.3 主要实验仪器
    2 方法
        2.1 EAU模型建立
        2.2 EAU大鼠眼部炎症观察
        2.3 组织病理学检查
        2.4 统计学分析
    3 结果
        3.1 EAU大鼠眼部炎症表现
        3.2 病理分析
    讨论
    小结
第三部分 EAU大鼠淋巴结、脾脏Th17/Treg细胞及相关因子表达的动态研究
    引言
    1 实验材料
        1.1 实验动物
        1.2 试剂
        1.3 主要实验仪器
    2 方法
        2.1 EAU模型建立
        2.2 单细胞悬液制备
        2.3 分离纯化T淋巴细胞
        2.4 流式细胞仪检测
        2.5 ELISA检测
        2.6 实时荧光定量PCR检测
        2.7 统计学分析
    3 结果
        3.1 Th17、Treg细胞表达
        3.2 IL-17、IL-6、IL-10和TGF-β的表达
        3.3 IL-17、IL-6、Foxp3和TGF-β mRNA表达
    讨论
    小结
结论
参考文献
附录
致谢
论文著作



本文编号:3416756

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