三例眼部突变小鼠的培育、特征分析及一例小眼小鼠突变基因的染色体定位

发布时间：2021-11-23 12:24

　　本实验利用乙基亚硝基脲（ENU）诱变实验,经遗传学检测、临床诊断及病理学观察,最终获得了3种可稳定遗传的眼部异常小鼠;接着采用微卫星标记连锁分析的方法对一例小眼球小鼠进行了突变基因的染色体定位。具体工作如下:1.利用ENU处理8¹0周龄的C57BL/6J（B6）清洁级雄鼠120只（G0）,与同品系小鼠繁育获得G1代,经筛查获得眼部突变表型小鼠65只,经遗传学检测、临床诊断及病理学观察,最终获得可稳定遗传突变小鼠3例,分别表现为角膜混浊、小眼球、虹膜异常。2.利用微卫星标记连锁分析法,对小眼球突变小鼠进行突变基因染色体定位,发现其与D8Mit4之间的LOD值为2.53,将突变基因定位在小鼠8号染色体D8Mit4附近。本实验成功培育了3例眼部突变表型小鼠,经临床诊断及病理学观察,提示3例突变表型小鼠与人类相关眼疾极为相似,为人类眼部疾病提供了良好的材料;针对突变表型小眼球1例,将该突变系小鼠突变基因定位在第8号染色体D8Mit4附近,为后续突变基因的精确定位奠定了坚实的基础。 

【文章来源】：杭州师范大学浙江省

【文章页数】：47 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
致谢
摘要
ABSTRACT
1 综述
    1.1 脊椎动物眼部结构
        1.1.1 眼球
        1.1.2 视路
        1.1.3 眼部附属器
    1.2 脊椎动物眼部发育过程
        1.2.1 眼部发育中的一些关键基因
    1.3 眼部突变小鼠与人类眼部疾病
        1.3.1 B6-Co小鼠与人类角膜炎
        1.3.2 APC~(Min)小鼠与人近视
        1.3.3 DBA/2J小鼠与人青光眼
    1.4 眼部突变小鼠国内外研究现状
        1.4.1 利用基因敲除技术构建的眼部基因突变小鼠模型
        1.4.2 化学试剂诱变获得的眼部异常小鼠
        1.4.3 自发性眼部突变小鼠
    1.5 研究意义
2 三例眼部突变小鼠的培育及特征分析
    2.1 实验动物
    2.2 试剂与仪器
    2.3 实验方法
        2.3.1 ENU诱变及突变表型筛选
        2.3.2 突变系小鼠繁育及遗传模式检测
        2.3.3 临床诊断及病理学检查
    2.4 结果
        2.4.1 ENU诱变及表型筛选情况
        2.4.2 遗传模式检测
        2.4.3 临床检测及病理学观察结果
    2.5 讨论
        2.5.1 ENU诱变的使用剂量及诱变小鼠品系的选择
        2.5.2 突变表型与人类类似症状眼疾
        2.5.3 应用前景
3 一例小眼球小鼠突变基因的染色体定位
    3.1 实验材料
        3.1.1 实验动物
        3.1.2 动物饲养条件
        3.1.3 主要仪器和设备
        3.1.4 主要试剂
    3.2 实验方法
        3.2.1 定位用F2代小鼠的繁殖
        3.2.2 DNA样本的准备
        3.2.3 PCR扩增F2代DNA样本
        3.2.4 PCR产物电泳
        3.2.5 计算LOD值
    3.3 结果
        3.3.1 标记选择及F2小鼠的繁殖
        3.3.2 连锁分析结果
        3.3.3 突变基因的位置
    3.4 讨论
        3.4.1 分子标记法在基因定位中的应用
        3.4.2 定位策略的选择
        3.4.3 小眼球小鼠的突变基因定位的意义及后期工作
参考文献


【参考文献】：
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本文编号：3513877